Текст книги "Чудо-муха"

Объект физиологических исследований

Некоторые особенности строения и развития

Каллифора – довольно крупная, около 1 см, муха тёмно-синего цвета с металлическим блеском (рис. 3). Её тело покрыто достаточно прочной кутикулой, которая образует наружный скелет, состоящий из отдельных плотных пластинок, соединённых тонкой эластичной перепонкой. В состав тела входят хорошо обособленные голова, грудь и брюшко. По бокам головы находятся сложные фасеточные глаза (у самцов в верхней половине головы они соприкасаются, а у самок широко расставлены). К голове прикреплена пара антенн (усиков), состоящих из трёх члеников и перистой аристы. Антенны принимают участие в регуляции полёта мухи. Хоботок – ротовой аппарат фильтрующего типа. С грудью подвижно сочленяются три пары конечностей, пара крыльев и пара жужжалец, представляющих редуцированные задние крылья. Ноги состоят из бедра, голени и 5-члениковой лапки с коготками и присосками, благодаря последним муха способна ползать по гладкой поверхности. Брюшко мухи состоит из пяти соединённых мягкой мембраной сегментов, которые хорошо растягиваются при сильном заполнении кишечника пищей, а также при созревании яиц. Последние три сегмента брюшка самца преобразованы в половой аппарат, а у самки образуют телескопический яйцеклад с половым и анальным отверстиями на конце. Антенны, хоботок и ноги мухи оснащены массой разнообразных рецепторных сенсилл, являющихся органами чувств.

Рис. 3. Внешнее строение каллифоры. По: Lowne, 1890.

б – бедро; бр – брюшко; г – голова; гз – глаз; гл – голень; гр – грудь; л – лапка.

Личинка каллифоры – крупная, длиной до 1 см, червеобразной формы, голова и ноги отсутствуют. Её тело состоит из «головы», 3 грудных и 8 брюшных сегментов. Ввиду отсутствия наружной головной капсулы механической опорой головы служит хитиновый ротоглоточный аппарат сложного строения, хорошо приспособленный к питанию полужидкой пищей. Благодаря непрерывным движениям ротовых крючьев (втягивание и вытягивание), пища засасывается и поступает в кишечник. Кишечник подразделяется на переднюю, среднюю и заднюю кишки. В переднюю кишку открываются протоки слюнных желёз и зобный проток. В объёмистый зоб пища поступает при заполненном состоянии средней кишки.

В процессе развития каллифора проходит стадии яйца, личинки (три возраста), куколки (она развивается внутри пупария) и имаго (собственно муха). Самый ответственный и впечатляющий момент развития связан с «рождением» мухи, т. е. вылуплением её из пупария, выходом из грунта и последующими событиями – расправлением крыльев, пигментацией и затвердением покровов. Разрыв пупария осуществляется за счёт пульсации специального органа – лобного пузыря, характерного приспособления многих мух. Лобный пузырь служит мухе своего рода «копательным орудием» для выхода на поверхность почвы. Его работа сводится к следующему: брюшко сокращается, и кровь перегоняется в лобный пузырь; сокращением мышц грудь и брюшко подтягиваются к голове, которая действует подобно якорю. Затем лобный пузырь сокращается и втягивается в голову, а брюшко слегка раздувается; когда лобный пузырь снова выпячивается, голова мухи продвигается вперёд примерно на 1 мм. В своём движении муха ориентируется на свет. Ритмические сокращения лобного пузыря стимулируются контактом тела с окружающими предметами. Своевременный выход отродившейся мухи из субстрата – совершенно необходимое условие для всей цепи последующих событий её жизни. Если искусственно задержать выход мухи из почвы на 12–14 ч, то у неё не затвердевают покровы, и она теряет способность расправлять крылья. Процесс расправления крыльев состоит из трех фаз: 1-я включает «бегательные» и очистительные движения передних ног; на 2-й фазе очистительные движения ног сочетаются с накачиванием воздуха в переднюю часть средней кишки с помощью особого глоточного насоса. Частота пульсации насоса составляет примерно 34 цикла в минуту. В первой половине 3-й фазы частота накачивающих движений возрастет до 160 пульсаций в минуту. Этот пик накачивания воздуха примерно совпадает с полным расправлением крыльев, которое при 22 °С заканчивается через 40 мин после выхода из пупария. Опыты с блокированием хоботка и анального отверстия показывают, что расправление крыльев происходит только во время заглатывания воздуха. Известно, что затвердение кутикулы контролируется специальным гормоном, содержание которого в гемолимфе достигает максимума через 30–60 мин после выхода из пупария, и полностью он исчезает через 10 ч. Если «шею» мухи сразу после отрождения перевязать, т. е. изолировать место образования этого гормона (голову) от остальной части тела, то покровы тела вообще не затвердевают.

Основы физиологии некоторых систем органов

Основателем современной физиологии насекомых по праву считается английский ученый В.И. Уиглсуорс, опубликовавший в 1932 г. первую книгу «Физиологию насекомых», затем последовали руководства и других авторов. Об активном развитии этого раздела энтомологии красноречиво свидетельствуют периодические иностранные издания, такие как «Успехи физиологии насекомых» (43 тома), «Обзоры по физиологии и биохимии насекомых» (13 томов) и «Журнал физиологии насекомых» (58 томов по 12 номеров в год). Отечественная литература по этому вопросу гораздо скромнее: «Основы физиологи насекомых» Н.Я. Кузнецова (1948, 1953) и «Основы физиологии насекомых» В.П. Тыщенко (1976, 1977). И в этом море информации каллифора как объект исследования фигурирует абсолютно во всех разделах физиологии.

Из всех систем органов, изученных у каллифоры как модельного объекта физиологии насекомых, рассмотрим в качестве примера только некоторые, наиболее сложные и интересные. Это – пищеварительная, нейроэндокринная и сенсорная системы.

Механизм приёма пищи и физиология пищеварения у каллифоры давно привлекали внимание учёных и к настоящему времени достаточно хорошо разработаны. Пищеварительная система мухи состоит из глотки, пищевода, зоба с зобным протоком, мышечного желудка, средней, задней кишок с ректумом (рис. 4). Передняя кишка простирается от глотки до центра желудка, далее до места впадения мальпигиевых сосудов следует средняя кишка, и наконец задняя. В переднюю кишку открываются протоки слюнных желёз. Глотка и пищевод обеспечивают проглатывание пищи и прохождение её в зоб. Зоб имеет хорошо развитую мускулатуру, позволяющую ему сильно растягиваться. Он служит резервуаром для запасания жидкой пищи, откуда она в случае надобности перекачивается в желудок и далее в среднюю кишку. Полужидкая пища, типа фекалий, обычно минуя зоб, направляется в среднюю кишку, где происходит всасывание продуктов переваривания. Основная функция задней кишки – всасывание воды из пищевой массы и образование экскрементов.

Рассмотрим наиболее интересные события в процессе питания и пищеварения мухи, а именно, расправление хоботка и приём пищи, образование и функции перитрофической оболочки и пищеварительные ферменты.

Расправление хоботка и приём пищи. Приём пищи мухой начинается с расправления сложенного хоботка. Расправление хоботка стимулируют хеморецепторы хоботка и лапок, ответственные за восприятие химических соединений. Оральный диск, расположенный на конце хоботка, состоит из двух лопастей (лабеллумов), снабжённых системой так называемых псевдотрахейных каналов с порами, и «зубов». Процесс расправления орального диска представляет сложный акт и включает шесть основных положений, обусловленных консистенцией поглощаемой пищи (рис. 5). В положении покоя псевдотрахейная система спрятана, так как вентральные поверхности лопастей сложены друг с другом. Во втором положении (фильтрационном) оральный диск расправляется, плотно прижимается к поверхности кормового субстрата, а гибкая псевдотрахейная система заполняет все его неровности и функционирует как фильтр. В третьем, чашеобразном положении, края лабеллумов немного загибаются вниз. При переходе к четвёртому положению зона зубов выворачивается и оказывается в одной плоскости с поверхностью орального диска. Дальнейшее отгибание лабеллумов наружу отключает от работы псевдотрахейную систему вследствие потери контакта с субстратом и выдвигает «зубы», при покачивании хоботка они царапают и измельчают субстрат. Дальнейшее выворачивание лабеллумов выключает из работы и «зубы» и приближает вплотную к питательному субстрату ротовое отверстие (питьевое положение). Лабораторные наблюдения показывают, как муха пользуется своим хоботком. С помощью фильтрующего положения хоботка муха потребляет раствор сахара с взвешенными частицами, растекающийся в виде тонкой плёнки по поверхности. Более крупные капли сиропа, молока и сыворотки поглощаются хоботком в чашеобразном положении. Сахар и засохшие сгустки крови утилизируются посредством соскрёбывания зубами с периодическим увлажнением слюной. Субстрат жидкой или полужидкой консистенции, типа воды и жидких фекалий, всасывается хоботком с питьевым положением орального диска.

Рис. 4. Схема строения пищеварительной системы каллифоры. По: Graham-Smith, 1934.

Вид со спинной стороны. бж – брюшная часть слюнной железы; гж – грудная часть слюнной железы; г – глотка; ж – желудок; жп – желудочный клапан пищевода; з – зоб; зк – задняя кишка; зп – зобный проток; м – мозг; мс – мальпигиевы сосуды; п – пищевод; пг – пищевой проток гаустеллума; пк – передний клапан пищевода; р – ректум; рк – ректальный клапан; ск – средняя кишка; сн – слюнной насос.

Рис. 5. Положение орального диска хоботка каллифоры при питании разными субстратами. По: Graham-Smith, 1930.

1 – положение покоя; 2 – фильтрационное; 3 – чашеобразное; 4 – растянутое; 5 – скребущее; 6 – питьевое. з – зубы; о – оральное отверстие; псевдотрахеи; п – псевдотрахеи.

Передвижение пищи по кишечнику обеспечивают регулярные перистальтические движения отдельных его частей, разделённых многочисленными клапанами. Особая роль в этом процессе принадлежит зобу. Перекачка пищи из зоба в среднюю кишку осуществляется путём согласованной деятельности клапанов зобного и желудочного протоков. Часть пищи из зоба периодически отрыгивается наружу для увлажнения твёрдой пищи. При этом муха может отрыгивать и втягивать каплю до 10-12 раз; проходя через хоботок она каждый раз дополнительно обогащается новыми порциями слюны. Отрыжка поступает обратно в зоб или следует прямо в среднюю кишку.

Перитрофическая оболочка и её функции. Перитрофическая оболочка, или мембрана, найдена у многих насекомых. У мух её образуют специальные клетки желудка только в период принятия пищи или даже после этого. Скорость формирования мембраны составляет 3,5 ± 1 мм/ч. Она встречается на протяжении среднего и заднего отдела кишечника в виде хитиноподобной плёнки, обволакивая пищевую массу или экскременты и выделяясь вместе с ними. Проницаемость перитрофической оболочки для разных пищевых компонентов и ферментов изучена экспериментально. В одних случаях удалённая мембрана завязывалась на одном конце и наполнялась исследуемой жидкостью; изменения в тургоре препарата служили показателем прохождения веществ через неё. В других случаях использовался метод диализа: наполненная тестируемым раствором перитрофическая мембрана помещалась в воду, и потом в воде с помощью индикаторов определяли присутствие тех или иных веществ. Установлено, что она проницаема в обоих направлениях для воды, солей, кислот, моно– и дисахаридов, а также для конечных продуктов белкового гидролиза – аминокислот. Продукты неполного гидролиза задерживаются внутренним слоем оболочки. Высокомолекулярные полисахариды типа крахмала и белки через неё не проходят. Итак, перитрофическая оболочка представляет сложную систему с избирательной проницаемостью для ряда веществ. Она пропускает ферменты средней кишки к пищевой массе и разрешает эпителию кишечника абсорбировать только конечные продукты пищеварения. С избирательной проницаемостью оболочки, видимо, связана и её барьерная роль при защите организма мухи от заражения инфекционным началом, так как насыщенная органическими разлагающимися веществами пища содержит богатую микрофлору.

Пищеварительные ферменты имаго и личинки.

Набор пищеварительных ферментов насекомых обычно определяется их пищевой диетой. Имаго каллифоры активно питаются углеводами, поэтому в их кишечнике присутствуют высокоактивные карбогидразы, осуществляющие гидролиз олиго– и полисахаридов. В результате тщательного изучения гидролитических способностей гомогенатов из разных отделов кишечника каллифоры установлен основной набор присутствующих там карбогидраз. Амилаза разлагает такие полисахариды растительного и животного происхождения, как крахмал и гликоген, с образованием мальтозы и глюкозы. Трегалоза расщепляется как универсальной А-глюкозидазой, так и специфической трегалазой. Ферменты группы эстераз, расщепляющие жиры и масла, найдены в средней кишке. Протеазы, расщепляющие белки, представлены пепсино-и трипсиноподобными ферментами.

У личинки каллифоры набор пищеварительных ферментов – протеазы и липазы – также связан с её пищевой специализацией, питанием белковыми субстратами. Протеазы в начале и конце средней кишки представлены пепсиноподобным ферментом, трипсин и трипсиноподобный ферменты встречаются на протяжении всего кишечника. У личинок мясных мух выражено внекишечное пищеварение, при котором питательный субстрат подвергается предварительное обработке пищеварительными ферментами; под их воздействием он разжижается, и личинки заглатывают его в виде мелких частиц. Окончательное переваривание пищи и её всасывание происходит в средней кишке. Протеолитические ферменты личинок каллифоры оказываются настолько стабильными, что при 25 °С культуральная среда быстро насыщается ими. Так, ежедневная продукция протеиназы составляет 36–53 мг в день на 1 кг личинок; такой темп выделения энзима вполне сравним с уровнем секреции трипсина поджелудочной железой позвоночных. Выделенные энзимы хорошо работают в щелочной среде (рН 7–9) и необратимо инактивируются в кислой (рН = 4). Щелочная среда создаётся за счёт выделения личинками в качестве конечного продукта свободного аммиака. Резкий запах аммиака всегда присутствует при питании личинок мясом или рыбой.

Взрослая муха. Известно, что нейроэндокринная система насекомых контролирует в организме все важнейшие физиологические процессы. Нейроэндокринная система мухи включает нейросекреторные клетки мозга (слившихся надглоточного и подглоточного ганглиев), а также прилежащие и кардиальные тела, образующие ретроцеребральный комплекс нейрогемальных и железистых органов. Нейросекреторные клетки обладают свойствами как железистых, секретирующих, так и нервных клеток. Они вырабатывают и выделяют в гемолимфу вещества гормональной природы. В мозге выделено 4 типа таких клеток (всего 32 клетки), различающихся размером и характером секрета. Нейросекрет из мозга поступает в кардиальное тело через парные нервы. Таким образом, кардиальное тело каллифоры служит нейрогемальным органом, запасающим нейросекрет из клеток мозга, и одновременно выполняет и собственную эндокринную функцию посредством своих нейросекреторных клеток.

Деятельность нейросекреторных клеток мозга и прилежащего тела в сочетании с типом питания мух контролирует процесс созревания яиц. Регулирующая роль мозга в этом процессе подтверждена многочисленными фактами. Гистологическими методами установлены циклы синтетической активности медиальных нейросекреторных клеток, определённым образом связанных с питанием самок и стадией развития яиц. На сахарной диете ядра и количество секрета в них сначала увеличиваются, и его гранулы появляются в аксонах нервных клеток, а затем синтетическая активность затухает, и яичники не развиваются. При питании мясом их синтетическая активность угасает лишь ко времени окончательного развития яиц. В изучении эндокринологии каллифоры большое место занимают разнообразные микрохирургические операции – удаление, пересадка органов, переливание гемолимфы и т. п. Это стало возможным, благодаря её исключительной выносливости и способности к восстановлению. Прямое доказательство участия нейросекреторных клеток мозга в контроле репродукции получено путём их удаления, в результате чего яйца не созревают. Имплантация этих клеток стимулирует развитие яиц. Объём прилежащего тела также претерпевает циклические изменения в связи с периодическим созреванием яиц. Прилежащее тело выделяет ювенильный гормон, стимулирующий созревание яиц. Максимальный его объём, свидетельствующий о максимальной активности железистых клеток, наблюдается в начале каждого репродуктивного цикла, а последующее его уменьшение является следствием выделения гормона. Этот гормон индуцирует так называемый вителлогенез, т. е. отложение желтка в развивающихся яйцах. Роль прилежащего тела в репродукции каллифоры изучена в многочисленных экспериментах с его удалением и пересадками. Если его удаляют у молодых мух в возрасте менее 4 ч, то у 86 % оперированных особей развитие яиц останавливается на ранней стадии; с увеличением возраста, в котором происходит операция, доля несозревших самок постепенно уменьшается, так как к этому времени прилежащее тело успевает выделить гормон. Имплантация прилежащих тел от других самок и даже самцов оперированным самкам приводит к развитию яичников в 93 % случаев. Процесс созревания яиц характеризуется отложением в них большого количества желточного белка, предшественником которого служат вителлогенины, синтезируемые жировым телом самки. Существование строгой корреляции между их синтезом и созреванием яиц навело учёных на мысль, что синтез вителлогенинов контролируется каким-то фактором, выделяемым самими яичниками. Им оказался известный гормон экдизон. Это подтверждается выделением экдизона из желтка яиц каллифоры. Таким образом, медиальные нейросекреторные клетки мозга активируют деятельность кардиального и прилежащего тел, а также осуществляют косвенное влияние на развитие яичников посредством контроля белкового метаболизма, связанного с развитием яиц.

Гормоны регулируют и другие процессы, в частности, контроль содержания углеводов в крови (гемолимфе) каллифоры. Трегалоза – главный лабильный источник энергии у насекомых; его количество в гемолимфе поддерживается на постоянном уровне благодаря динамическому равновесию с запасом гликогена в жировом теле. Экспериментально показано, что кардиальное тело мухи выделяет гипергликемический гормон, повышающий уровень трегалозы, причём активация кардиального тела осуществляется мозгом. Так, после электростимуляции мозга содержание трегалозы в гемолимфе увеличивается в течение 20 мин почти вдвое. Значительное повышение уровня трегалозы также наблюдается у мух, получивших инъекцию гемолимфы, обогащённой этим гормоном. Значение гипергликемического гормона велико, так как он обеспечивает в случае необходимости быструю мобилизацию резервных углеводов. Известно, что трегалоза служит главным источником энергии для работы крыловой мускулатуры насекомых. Так, при непрерывном полёте в течение 45 мин её концентрация в гемолимфе каллифоры остаётся на одном уровне; после удаления кардиального тела или перерезки его нервов количество трегалозы резко снижается уже после 15-минутного полёта, а через 45 мин наступает полное истощение лётных способностей мухи. У неё существует и гипогликемический гормон, снижающий уровень содержания углеводов в гемолимфе. Это подтверждают опыты с инъекцией гомогенатов из медиальных секреторных клеток мозга или экстрактов из головы. Кроме того, из мозга выделено вещество, биологическая и иммунологическая активность которого напоминает гипогликемический гормон позвоночных – инсулин. Таким образом, пептидные гормоны типа инсулина и панкреатических полипептидов свойственны не только позвоночным, но и насекомым, при этом бигормональный механизм регуляции углеводного обмена у каллифоры оказывается принципиально сходным с таковым позвоночных.

У каллифоры экспериментальным путём обнаружена также гормональная регуляция выделения пищеварительных ферментов – протеаз. Обычно в случае питания мясом при 25 °С их активность достигает максимума у мух в возрасте 3–4 дней. Однако удаление медиальных нейросекреторных клеток мозга вскоре после отрождения мухи снижает активность протеаз на 2/3–3/4 от нормы. Удаление в это время прилежащего тела снижает активность этих ферментов только на 1/3.

Рис. 6. Топография нейросекреторных клеток мозга личинки каллифоры. По: Кудрявцева, 1978.

Группы представлены клетками разного типа: А-тип – светлые, В-тип – черные.

Личинка. Нейроэндокринная система личинки включает нейросекреторные клетки надглоточного («мозг») и подглоточного ганглиев и синганглия, получившегося путём слияния 3 грудных и 6 брюшных ганглиев (рис. 6). В неё также входят объединённые вместе прилежащее и кардиальное тела и проторакальная железа, этот комплекс известен как кольцевая железа (рис. 7). В мозге найдено 8 групп нейросекреторных клеток общим числом от 20 до 30, в подглоточном ганглии – 5 групп (26 клеток). Подобно другим насекомым, мозг личинки является источником активационного гормона, а прилежащее тело – источником ювенильного гормона, обладающего полифакториальным действием. Кардиальное тело служит главным нейрогемальным органом личинки, выполняя двойную функцию – запасающего и секретирующего органа. Кроме собственного секрета, сюда по одним нервам поступает секрет из мозга, а по другим нервам секрет выводится в прилежащее тело и проторакальную железу. Проторакальная железа – источник гормона линьки – экдизона. Взаимодействие всех перечисленных органов в регуляции развития и диапаузы личинок изучалось многими авторами с применением разных методик. Среди них микрохирургические операции (перевязки, инъекции, удаление и пересадка целых эндокринных органов или их частей), гистологическое изучение органов на протяжении развития, непосредственное измерение содержания эндогенного гормона и введение экзогенного гормона (экдизона). Такие исследования начались с простой перевязки личинки, которая показала, что окукливалась только её передняя часть с находившейся там нейроэндокринной системой, тогда как задняя часть оставалась в личиночном состоянии. Оказалось, что удаление всей кольцевой железы, или только одной проторакальной железы, или нарушение нервных связей между мозгом и кольцевой железой также приводило к остановке развития личинок. Пересадка им этого полного эндокринного комплекса вызывала возобновление развития и окукление. Гистологическим методом изучена активность нейросекреторных клеток в процессе развития, диапаузы и выхода из неё. При активном развитии пики активности медиальных секреторных клеток мозга были приурочены к окончанию питания и перед окукливанием личинок. Нейросекрет из них выводился в кардиальное тело, примерно в это же время активировалась деятельность проторакальных желёз. В случае наступления личиночной диапаузы в этих клетках происходило замедление синтеза и блокирование выхода секрета из мозга, он поступал в соответствующий орган только после прекращения диапаузы. Итак, у каллифоры существует двухступенчатый механизм гормональной регуляции линек, метаморфоза и диапаузы. Процесс начинается с активной деятельности определённых нейросекреторных клеток мозга. Нейросекреторный материал по соответствующим нервам поступает в нейрогемальные органы, а оттуда выбрасывается в гемолимфу. Затем активируется проторакальная железа, вырабатывающая линочный гормон экдизон. Обычно в течение первых семи дней развития личинки титр экдизона низок; резкий подъём наблюдается ко времени образования куколки. Второй подъём титра экдизона контролирует процесс развития куколки во взрослое насекомое.

Рис. 7. Схематическое изображение кольцевой железы личинки каллифоры. По: Thomsen, 1951. вн – возвратный нерв; кн – кардиакальный нерв; кт – кардиальное тело; пж – проторакальная железа; пт – прилежащее тело; т – трахея.

Согласно классической концепции, развитие насекомых регулируется балансом двух гормонов: экдизон стимулирует клетки покровной ткани к росту и линьке, а ювенильный гормон определяет характер покровов насекомого, т. е. в его присутствии формируются личиночные признаки, а при отсутствии – признаки взрослого насекомого. Имеющиеся данные по каллифоре укладываются в эту схему. Специальное исследование влияния обоих гормонов показало сходство механизмов их действия, мишенью которых является генный аппарат клетки.

Ещё одна важная функция экдизона состоит в контроле процессов неспецифической физиологической адаптации, известной ранее для позвоночных животных как синдром Селье. Она приводит к мобилизации защитных сил организма к разным повреждающим агентам физической или химической природы. Так, повреждение личинок каллифоры вызывает активацию экдизон-синтезирующей системы и увеличение титра экдизона. Инъекция экдизона нормальным особям повышает их устойчивость к повреждающим воздействиям и восстанавливает её у личинок, лишённых собственного источника этого гормона.

Личинок каллифоры широко используют в современной эндокринологии в качестве теста для количественного определения содержания экдизона в организме насекомых, а также для оценки активности так называемых экдистероидов – соединений растительного, животного или синтетического происхождения, наделённых активностью линочного гормона. Биологическое тестирование экдизона основано на опытах с перевязыванием личинок каллифоры, в результате чего задний конец личинки оказывается лишённым собственных эндокринных органов и находится в перманентном состоянии. Именно задний конец служит для введения тестируемых экстрактов или нанесения препаратов, содержащих экдизон. Результат оценки их активности основан на процентном соотношении поверхности задней части, занятой куколочной или личиночной кутикулы (за 1 принимается реакция, когда вся поверхность покрыта куколочной кутикулой, а за 0 – личиночной). Одна каллифора-единица соответствует дозе экдизона, вызывающей окукливание 50–70 % поверхности задней части личинки, что примерно равно активности 0,01 мкг кристаллического экдизона на одну личинку.