Электронная библиотека » Елена Виноградова » » онлайн чтение - страница 6

Текст книги "Чудо-муха"


  • Текст добавлен: 3 января 2018, 18:00


Автор книги: Елена Виноградова


Жанр: Биология, Наука и Образование


Возрастные ограничения: +12

сообщить о неприемлемом содержимом

Текущая страница: 6 (всего у книги 6 страниц)

Шрифт:
- 100% +

Методика лабораторного культивирования каллифоры

Методика лабораторного разведения каллифоры может быть востребована не только при проведении научных исследований, но и в случае необходимости получения живого материала для практических занятий по биологии или энтомологии в институтах соответствующего профиля и в школьных биологических кружках. В частности, на этом объекте можно изучать процесс развития, особенности поведения и биологию отдельных стадий развития и многие другие вопросы. Ниже приведено краткое описание методики лабораторного разведения каллифоры (вкл. рис. 18).

Мух содержат в садках, обтянутых тонкой полупрозрачной тканью или мелкой сеткой, с каркасом из дерева или проволоки и рукавом из ткани (для предотвращения вылета мух из садка во время смены корма). Размеры садков могут быть самыми разными в зависимости от количества мух. Например, удобны садки с дном 25 × 15 см и высотой 25 см, такой садок пригоден для содержания 100–150 мух.

Питание взрослых мух включает воду, белки и углеводы. Для воды можно использовать посуду с узким горлом или школьный стакан-неваляшку для рисования с вставленным поролоновым фитилём. Следует обратить особое внимание на чрезвычайную чувствительность мух к дефициту воды, в её отсутствие они быстро погибают. Лучшим белковым питанием, необходимым для созревания яиц, является мясо (печень, почки, сердце и прочее) и рыба, кусочки которых помещают в посуду, заполненную влажными опилками, покрытыми фильтровальной бумагой; корм периодически заменяют. Источником углеводного питания служат кусочки сахара или сахарный песок.

Личинок выкармливают на тех же белковых субстратах, которые используются для мух. В зарубежной практике для этой цели применяют и полусинтетические среды; получение стерильных личинок для медицинских целей производится по специальной методике. Обычно мухи откладывают яйца только на свежий субстрат. Во избежание подсыхания яиц, их вместе с субстратом следует перенести в специальные резервуары (поллитровые банки или другие контейнеры), заполненные наполовину слегка увлажнёнными опилками или песком. В банке может развиваться 200–400 личинок. Распределение личинок по банкам удобно производить сразу после их отрождения с помощью откалиброванного мерного стаканчика, ложки или пинцета. Банки с помощью резинок закрывают плотной тканью. В них следует поддерживать оптимальный режим влажности опилок путём добавления сухих опилок, так как при излишней увлажнённости личинки покидают корм и пытаются вылезти. Корм личинкам добавляют по мере необходимости. Показателем их нормального развития служит появление запаха аммиака и отсутствие гниющего мяса.

Окончившие питание личинки обычно концентрируются на дне банки и после опустошения зоба, перед окукливанием их целесообразно перенести в чистые, слегка увлажнённые опилки. Для быстрого отделения личинок от загрязнённых опилок можно использовать набор почвенных сит с отверстиями соответствующего диаметра. Скорость и продолжительность развития от яйца до вылета мух показана на рис. 13 (см. с. 67).

Вести культуру мух можно в комнате или в специальных фототермостатах с регулируемыми температурой и длительностью освещения; во втором случае необходима установка вентиляции. При получении большого объёма живого материала целесообразно раздельное содержание мух и питающихся личинок, выделяющих аммиак. Для содержания мух наиболее благоприятны температуры 20–23 °С и длина дня более 16 ч в сутки. В этих условиях мухи начинают яйцекладку на 15–20-й день; при более коротком дне и низкой температуре возможна задержка развития яичников у части особей.

На основании многочисленных экспериментальных данных, полученных на 21 культуре каллифоры, происходящей из разных частей ареала, предлагается три способа временной консервации культуры мух в холодильнике.

Культуру каллифоры можно сохранять в виде диапаузирующих самок при 4–6 °С и темноте в течение 2–3 месяцев, а иногда и более (в зависимости от географического происхождения популяции). Первые пять дней жизни мух следует держать при коротком дне (например, 12 ч света в сутки) и температуре 10–12 °С на углеводном питании, а затем поместить в условия более низкой температуры. Для поддержания жизнедеятельности во время искусственной зимовки каждые 20 дней мухам следует предоставлять возможность питаться углеводами при 20 °С (3–4 ч). Перевод мух из диапаузного в активное состояние можно осуществить в любой момент путём перемещения в условия температуры 20 °С, при которой яйцекладка начинается через 10–17 дней.

При хранении культуры в виде активных, яйцекладущих мух, они предварительно содержатся при 20–23 °С и длинном дне на углеводной и белковой пище, где начинают яйцекладку, после чего переводятся в условия 4–6 °С и темноты. Им также необходима периодическая подкормка при 20 °С. В таком виде мух можно сохранять до 2–3 месяцев; яйцекладка начинается через 2–3 дня после возвращения мух в условия 20 °С.

Подготовка мух для хранения в виде диапаузирующих личинок включает следующие этапы. Содержание мух-родителей при коротком дне и 20 °С на углеводном и белковом субстратах; получение групповой яйцекладки, отложенной в течение 5–6 ч, помещение её в условия короткого дня при 12 °С до отрождения личинок; только что отродившиеся личинки переводятся в условия низкой температуры (около 3–6 °С). Там их по мере необходимости подкармливают мясным субстратом, который они покидают и достигают диапаузирующей стадии; таких личинок следует поместить в чистые опилки. В этих условиях личинок можно хранить 8–9 и даже 12 месяцев, периодически слегка увлажняя опилки. Максимальный срок хранения зависит от интенсивности их диапаузы, т. е. от их географического происхождения, и температуры. Перевод культуры в активное состояние происходит при повышении температуры (20–25 °С), тогда пупариация осуществляется в течение 3–5 дней, а вылет имаго через 8–10 дней.

Литература

Бастос А.Р. 1980. Я, Верховный… М.: Прогресс.

Виноградова Е.Б. 1984. Мясная муха Calliphora vicina – модельный объект физиологических и экологических исследований // Труды Зоологического института АН СССР. Т. 118. 272 с.

Виноградова Е.Б. 1991. Диапауза мух и её регуляция // Труды Зоо логического института АН СССР. Т. 214. 254 с.

Кинд Т.В. 2012. Функциональная морфология гемоцитов мясной мухи // Цитология. Т. 54. № 11. С. 806–822.

Кругликова А.А., Черныш С.И. 2013. Хирургические личинки и история их применения // Энтомол. обозрение. Т. 92. № 1. С. 12–23.

Курючкин В.А. 1970. Микрофлора и некоторые вопросы эпидемиологического значения мух семейства Calliphoridae. Автореферат дис. на соиск. уч. степ. канд. мед. н. Иваново. 18 с.

Леунов В.И., Ховрин А.Н., Юрковская М.Е., Багров Р.А., Клыгина Т.А. 2011. Влияние условий среды и переносчиков пыльцы на семенную продуктивность моркови столовой (Dacus carota) // Карпология и репродуктивная биология высших растений. Материалы Всероссийской научной конференции, посвященной памяти профессора А.П. Меликяна. 18–19 октября 2011. М. С. 279–280.

Марченко М.И. 1989. Методика ретроспективного определения начала развития насекомых на трупе // Суд. мед. экспертиза. № 1. С. 17–20.

Марченко М.И., Кононенко В.И. 1991. Практическое руководство по судебной энтомологии. Харьков. 68 с.

Черныш С.И., Гордя Н.А. 2011. Иммунная система личинок Calliphora vicina (Diptera, Calliphoridae) как источник лекарственных веществ // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. Т. 47. 6. С. 444–452.

Aak A.A. 2010. Mass trapping of the blowfly Calliphora vicina (Diptera: Calliphoridae) in Norwegian stockfish production areas – lure development, damage reduction, and pest species phenology. PhD thesis. Series of dissertations submitted to the Faculty of Mathematics and Natural sciences University Oslo. No. 1018. 33 p.

Chernnysh S.I., Kim S.I., Bekker G. et al. 2002. Antiviral and antitumor peptides from insects // Proc. Natl. Acad. Sci. Vol. 99. No. 20. P. 12628–12623.

Fetene T., Worku N. 2009. Public health importance of non-biting cyclorrhaphous flies // Trans. R. Soc. Trop. Med. Development. Vol. 103. No. 2. P. 187–191.

Greenberg B. 1971. Flies and disease. Ecology, classification and biotic association. N.-Y. Vol. 1. 856 p.

Greenberg B. 1991. Flies as Forensic Indicators // J. Medical Entomology. Vol. 28. No. 5. P.565–577.

Nachtigall W. 1984. Calliphora erythrocephala as a model system for analyzing insect flight // Comprehensive Insect Physiology., Pharmacology. Oxford, N.-Y. Vol. 5. P. 571–605.

Saunders D.S., Kenny N., Richard D.S. 1988. The blowfly Calliphora vicina: some problems in photoperidism and diapause endocrinology // Endocrinological frontiers in physiological ecology. P. 293–308.

Sherman R.A. 2009. Maggot therapy takes us back to the future of wound care: new and improved maggot therapy for the 21st centure // J. Diabetes Sci. Technol. Vol. 3. P. 336–344.

Sherman R.F., Hall M.J.P., Thomas S. 2000. Medicinal maggots: An ancient remedy for some cotemporary afflictions // Annu. Rev. Entomol. Vol. 45. P. 55–81.

Summary

The blowfly Calliphora vicina R.-D. (= erythrocephala) is widely distributed in all climatic zones excluding tropics. Its life cycle includes the stages of egg, larva, puparium (pupa) and adult. This is a hemisynanthrope occurring both in field and settlements. The flies feeding on different substrata (meat, fish, carrion, faeces, milk products, fermentating fruits, ets.) are vectors of the intestinal purulent infections of people and animals. Flies feeding nectar pollinate plants. They are also used as pollinators in greenhouses (onion, carrot, Bussels sprout). The larvae developing on different organic wastes (carrions, fishes, faeces, etc.) are their destructors fulfilling in field a sanitary role. The calliphora larvae are pest of the stockfish production in Norway, south Africa and other countries. C. vicina for a long time is a popular model insect in various branches of science and practice: physiology, immunology, ecology, biological rhythms, forensic entomology, medicine and biopharmacology. This fly is used in all divisions of physiology, and the ingestive, endocrinological and sensory systems are considered as examples. Calliphora is used in experimental studies of photoperiodism, seasonal development and diapause in insects. It is used in forensic entomology as most accurate forensic indicator of time of death from homicides, suicides and questinable causes. The larvae of calliphora developing in aggressive environment are characterized by high level of immunity and medicinal abilities. They remove succeffully the dead tissues from wounds and promote healing. The maggot therapy is effective in medical treatment of infected wounds of various aetiology (pressure ulcer, diabetic foot wounds, traumatic and post-surgical wounds, etc.). The complex of the antimicrobial peptides (defensins, prolin-rich peptides, cecropin and diptericines) and also alloferone were isolated from fat dody and haemolymph of infected larvae. The clinic testes of the preparation based on these peptides showed their efficacy against purulent skin infections which are stable against antibiotic. The preparation Allomedin based on modified alloferon is used now against virous infections of herpes and papillomes of peoples.


Рис. 1. Синяя мясная муха Calliphora vicina.


Рис. 2. Стадии развития каллифоры. Фото С.А. Филимоновой.

1 – яйцекладки на субстрате; 2 – закончившие питание личинки; 3 – куколки (пупарии).


Рис. 15. Чашечный тест, иллюстрирующий антимикробную активность гемолимфы инфицированных личинок каллифоры. Агаровая пластина засеяна бактерией Micrococcus luteus, нанесённая на неё капля гемолимфы подавляет вокруг себя рост бактерий. Фото А.Ю. Яковлева.


Рис. 16. Антивирусный препарат Алломедин, созданный на основе соединений, синтезируемых личинками каллифоры. Эффективен против вируса простого герпеса и папилломы человека и животных.


Рис. 17. Жёлтые липкие ловушки, используемые для снижения численности каллифоры, вредящей производству вяленой трески на Лофотенских островах, Норвегия. Фото G.K. Knudsen.


Рис. 18. Разведение мух в лаборатории (Университет Осло). а – садок для мух; б – контейнеры для содержания личинок; в – микроклиматическая камера с садками. По: A. Aak, 2010.


Рис. 19. Каллифора (рисунок Е. Беляковой).


Страницы книги >> Предыдущая | 1 2 3 4 5 6
  • 0 Оценок: 0

Правообладателям!

Это произведение, предположительно, находится в статусе 'public domain'. Если это не так и размещение материала нарушает чьи-либо права, то сообщите нам об этом.


Популярные книги за неделю


Рекомендации