Текст книги "Методы и методики количественного анализа. Практическое пособие"

3.7. Примеры применения методов окислительно-восстановительного титрования для анализа качества пищевых продуктов

3.7.1. Перманганатометрия. Определение йодистого калия

Порядок определения йодистого калия перманганатным методом в соли поваренной установлен ГОСТ 13685—84. Метод основан на окислении йодида калия марганцовокислым калием, удалении избытка марганцовокислого калия при помощи щавелевой кислоты и титровании выделившегося йода тиосульфатом натрия.

Из аналитической пробы берут навеску соли массой 20 г, растворяют в 80 см³ дистиллированной воды. Раствор фильтруют в коническую колбу, промывая фильтр три раза дистиллированной водой. К полученному фильтрату добавляют при помешивании 4 см³ гидроокиси натрия и 5 см³ марганцовокислого калия. После тщательного перемешивания в полученную смесь добавляют 1,5 см³ серной кислоты и подогревают до 70°С – 80°С.

Избыток марганцовокислого калия разрушают щавелевой кислотой, добавляя 5 см³ указанного реактива. Если раствор не обесцвечивается, добавляют еще несколько капель щавелевой кислоты, интенсивно перемешивая содержимое колбы.

После охлаждения раствора до комнатной температуры добавляют 10 см³ свежеприготовленного раствора йодистого калия. Колбу закрывают пробкой и выдерживают 10—15 мин в темном месте. Далее титруют раствором тиосульфата натрия вначале без крахмала до светло-желтого цвета, затем добавляют 1 см³ крахмала и титруют до исчезновения окраски.

3.7.2. Перманганатометрия. Определение содержания танина

Метод определения содержания танина в чае установлен в ГОСТ 19885—74. Метод основан на окислении танина чая марганцовокислым калием при участии индигокармина в качестве индикатора.

Подготовка к анализу.

Первый способ. 2,5 г предварительно измельченной навески чая, взятой из средней пробы, с погрешностью взвешивания не более 0,0002 г, помещают в колбу вместимостью 250 см³, приливают 200 см³ кипящей дистиллированной воды и ставят на водяную баню. Экстракцию ведут в течение 45 мин. Экстракт фильтруют под вакуумом через воронку Бюхнера в колбу вместимостью 500 см³, фильтрат переносят в мерную колбу вместимостью 250 см³, охлаждают и доводят дистиллированной водой до метки.

Второй способ. 2,5 г навески чая, взятой из средней пробы, с погрешностью взвешивания не более 0,0002 г, помещают в сосуд гомогенизатора вместимостью 400 см³, приливают 250 см³ кипящей дистиллированной воды и гомогенизируют в течение 2 мин при 12,0 тыс. об/мин. Часть экстракта (не менее 15 см³) фильтруют через четырехслойную марлю.

Проведение испытания. Пипеткой отбирают 10 см³ экстракта и помещают в выпарительную чашу, добавляют 750 см³ водопроводной воды, 25 см³ раствора индигокармина и титруют 0,1 н. раствором марганцовокислого калия при постоянном перемешивании стеклянной палочкой. Синяя окраска при этом постепенно переходит через сине-зеленую, темно– и светло-зеленую, желто-зеленую в желтую, золотистого оттенка. Конец реакции определяют по исчезновению зеленого оттенка и появлению чистого желтого цвета. Затем подсчитывают количество 0,1 н. раствора марганцовокислого калия в кубических сантиметрах, израсходованное на окисление танина.

Аналогичным образом устанавливают количество марганцовокислого калия, израсходованное на титрование раствора воды и индигокармина.

3.7.3. Йодометрия. Определение массовой доли йода и

тиосульфата натрия

Метод определения йода и тиосульфата натрия в соли поваренной пищевой йодированной установлены в ГОСТ Р 51575—2000.

Метод основан на окислении йодид-ионов марганцовокислым калием в щелочной среде до йодат-ионов, удалении избытка марганцовокислого калия щавелевой кислотой в кислой среде, восстановлении йодат-ионов до йода йодистым калием и титровании выделившегося йода тиосульфатом натрия в присутствии крахмала.

Растворы с установленной концентрацией и индикаторы готовят по ГОСТ Р 51575—2000.

20,000 г йодированной пищевой поваренной соли помещают в коническую колбу с притертой пробкой и растворяют в 100 см³ дистиллированной воды. К полученному раствору добавляют при помешивании 4 см³ раствора гидроокиси натрия и по каплям 5 см³ раствора марганцовокислого калия, раствор приобретает зеленовато-бурую окраску. После тщательного перемешивания в полученную смесь прибавляют градуированной пипеткой 1,5 см³ раствора серной кислоты и нагревают до 70—80 °С.

Избыток марганцовокислого калия разрушают добавлением пипеткой 5 см³ раствора щавелевой кислоты, при этом раствор обесцвечивается. После охлаждения раствора до комнатной температуры прибавляют цилиндром 10 см³ свежеприготовленного раствора йодида калия массовой доли 1%, колбу закрывают пробкой и выдерживают в темном месте 10—15 мин. Выделившийся йод титруют раствором тиосульфата натрия вначале без крахмала до соломенно-желтого цвета, затем добавляют пипеткой 1 см крахмала и продолжают титровать до обесцвечивания раствора.

Одновременно выполняют два параллельных определения.

Для учета влияния матрицы пробы и чистоты применяемых реактивов выполняют контрольный опыт, для этого к 20,000 г йодированной пищевой поваренной соли, не обработанной добавками йодида калия, или к химически чистому хлориду натрия прибавляют реактивы и проводят определение

3.7.4. Йодометрия. Определение массовой доли сахаров

Йодометрический метод определения сахаров в консервах молочных описан в ГОСТ 29248—91. Метод основан на окислении редуцирующих сахаров (лактоза, глюкоза) избытком йода в щелочной среде и определении содержания сахара по разности между количеством взятого йода и избытком йода, определяемого титрованием тиосульфатом натрия.

Приготовление фильтрата сгущенных молочных консервов. Сгущенные молочные консервы восстанавливают. Для этого в химический стакан вместимостью 200 см³ взвешивают 100 г сгущенного молока с сахаром, кофе или какао со сгущенным молоком и с сахаром или 50 г сгущенных сливок с сахаром, кофе или какао со сгущенными сливками и сахаром.

Пробу растворяют в небольшом количестве воды температурой 60—70 °С (для свежевыработанных консервов применяют воду комнатной температуры) и переносят количественно через воронку в мерную колбу вместимостью 250 см³. Закрывают колбу пробкой и содержимое ее тщательно перемешивают.

25 см³ разведенных сгущенного молока с сахаром, кофе или какао со сгущенным молоком и сахаром вносят в мерную колбу вместимостью 500 см³. 25 см³ разведенных сгущенных сливок с сахаром, кофе или какао со сгущенными сливками и сахаром вносят в мерную колбу вместимостью 250 см³. Колбу доливают водой до половины и содержимое ее тщательно перемешивают.

В колбу вносят 10 см³ раствора сернокислой меди, хорошо перемешивают и дают стоять 1 мин. Затем добавляют 4 см³ раствора гидроокиси натрия молярной концентрации 1 моль/дм³, содержимое колбы вновь хорошо перемешивают круговыми движениями, не взбалтывая, чтобы не вбить воздух в осадок, и оставляют в покое на 5 мин. После проявления над осадком прозрачного слоя жидкости, что указывает на полноту осаждения, колбу доливают водой до метки, содержимое сильно взбалтывают и оставляют в покое на 20—30 мин. Затем жидкость фильтруют через сухой складчатый фильтр в сухую колбу. Первые 25—30 см³ фильтрата отбрасывают.

Приготовление фильтрата сухих молочных продуктов. В химический стакан вместимостью 100 см³ взвешивают 5 г сухих смесей для мороженого.

Прибавляют постепенно небольшими порциями 10 см³ воду температурой 70—75°С, растирая смесь стеклянной палочкой до получения однородной массы. Содержимое переносят количественно в мерную колбу вместимостью 250 см³, смывая стакан водой температурой (20±2) °С. Общее количество жидкости в колбе доводят до 125—150 см³. Прибавляют в колбу 10 см сернокислой меди. Далее фильтрат готовят, как указано ранее, в соответствии с методикой приготовления фильтрата для сгущенных молочных консервов.

Определение редуцирующей способности фильтрата до инверсии.

В коническую колбу вместимостью 250 см³ приливают пипеткой 25 см³ фильтрата, что соответствует 0,5 г продукта, и 25 см³ раствора йода. Смесь перемешивают и затем приливают из бюретки медленно, при постоянном перемешивании 37,5 см³ раствора гидроокиси натрия молярной концентрации 0,1 моль/дм³. Закрывают колбу пробкой и оставляют в темном месте на 20 мин при 20°С. Через 20 мин в колбу приливают 8 см³ раствора соляной кислоты молярной концентрации 0,5 моль/дм³, перемешивают и титруют выделившийся йод раствором тиосульфата натрия, приливая его медленно при постоянном перемешивании, до светло-желтой окраски раствора. Затем добавляют 1 см³ раствора крахмала и продолжают титровать до исчезновения синевато-фиолетовой окраски.

Определение редуцирующей способности фильтрата после инверсии. 25 см³ фильтрата вносят в другую коническую колбу и, закрыв неплотно колбу пробкой с пропущенным в нее термометром так, чтобы ртутный шарик находился в жидкости, нагревают колбу на водяной бане до температуры 65—70 °С.

Приоткрыв пробку, приливают в колбу пипеткой 2,5 см³ соляной кислоты молярной концентрации 7,3 моль/дм³ для инверсии. Содержимое перемешивают круговыми движениями и колбу выдерживают в водяной бане при той же температуре 10 мин, при частом помешивании круговыми движениями в течение первых 3 мин. Не вынимая термометра, колбу быстро охлаждают до 20°С под струей воды. Затем добавляют в колбу 1 каплю раствора метилового оранжевого при непрерывном тщательном помешивании круговыми движениями и медленно приливают раствор гидроокиси натрия молярной концентрации 1 моль/дм³ до слабокислой реакции, при которой окраска раствора переходит из розовой в желтовато-оранжевую. Термометр вынимают из колбы, ополоснув его кончик первыми порциями раствора гидроокиси натрия в эту же колбу.

К нейтрализованному раствору приливают 25 см³ раствора йода, затем медленно, при постоянном помешивании, 37,5 см³ раствора гидроокиси натрия молярной концентрации 0,1 мoль/дм³, закрывают колбу пробкой и оставляют в темном месте на 20 мин при 20°С. Далее определение проводят, как указано ранее. Конец титрования устанавливают по переходу окраски из сине-фиолетовой в бледно-розовую.

3.7.5. Йодометрия. Определение массовой доли лактозы

Йодометрический метод определения лактозы (молочного сахара) в консервах молочных описан в ГОСТ 29248—91.

Приготовление фильтрата.

5,0 г сухого молока для детского питания, 6,7 г сухого цельного или обезжиренного молока, или 8,2 г сухих сливок без сахара взвешивают с отсчетом показаний до 0,005 г. Затем постепенно наливают горячую воду температурой 70—75 °С, растирая смесь стеклянной палочкой до получения однородной консистенции, и количественно переносят содержимое в мерную колбу вместимостью 250 см³, смывая стакан водой температурой (20±2) °С. Общий объем воды должен быть 125—150 см³.

При пробе продукта 5,0 г в колбу прибавляют 10 см³ раствора сернокислой меди, хорошо перемешивают и дают постоять 1 мин, затем добавляют 4 см³ раствора гидроокиси натрия молярной концентрации 1 моль/дм³. При пробе больше 5,0 г прибавляют 15 см³ раствора сернокислой меди и 6 см³ раствора гидроокиси натрия. Содержимое колбы вновь хорошо перемешивают круговыми движениями, не взбалтывая, и оставляют в покое на 10 мин. После появления над осадком прозрачного слоя жидкости колбу охлаждают до (20±2) °С, доливают водой до метки, содержимое сильно взбалтывают и оставляют в покое на 20—30 мин. Затем жидкость фильтруют через сухой складчатый фильтр в сухую колбу. Первые 25—30 см³ фильтрата отбрасывают. Далее анализ проводят, как указано выше.

3.7.6. Йодометрия. Определение массовой доли бромидов

Метод определения массовой доли бромидов в соли поваренной установлены в ГОСТ 13685—84. Метод основан на окислении бромидов гипохлоридом натрия в броматы, удалении избытка гипохлорида натрия при помощи муравьиной кислоты, титровании выделившегося из добавленного йодида калия свободного йода тиосульфатом натрия.

Из аналитической пробы взвешивают 20 г и растворяют в 100 см³ воды, добавляют 12 см³ раствора фосфорнокислого натрия и 20 см³ раствора гипохлорида натрия, нагревают до кипения и выдерживают при этой температуре в течение 10 мин. Затем добавляют 2 см³ муравьиной кислоты и нагревают еще в течение 5 мин. После охлаждения добавляют 3 см³ раствора йодистого калия, 10 см³ раствора серной кислоты и титруют выделившийся йод раствором тиосульфата натрия в присутствии крахмала. Одновременно таким же способом проводят титрование контрольной пробы.

3.7.7. Йодометрия. Определение перекисного числа

Метод определения перекисного числа в маслах растительных установлен в ГОСТ 26593—85. Стандарт распространяется на все виды растительных масел различной степени очистки и устанавливает метод определения их перекисного числа (содержание активного кислорода) в диапазоне значений 0,1—40 ммоль/кг.

При хранении растительных масел в них развиваются окислительные процессы, в основе которых лежат цепные реакции автоокисления непредельных жирных кислот. Перекисное число отражает степень окисленности жира или масла, обусловленную накоплением перекисных соединений (перекисей и гидроперекисей) при окислении жира или масла в процессе хранения, особенно активно протекающего на свету. Показатель «перекисное число растительного масла» может быть выражен в «мэкв (миллиэквивалентах) активного кислорода на килограмм масла», а также в виде «ммоль (миллимоль) активного кислорода на килограмм масла». Значение, выраженное в миллимоль активного кислорода на килограмм масла, составляет половину значения, выраженного в мэкв (миллиэквивалентах) активного кислорода на килограмм масла. Умножение перекисного числа, выраженного в мэкв (миллиэквивалентах) активного кислорода на килограмм масла, на эквивалентную массу кислорода (равную 8 г/моль) дает значение массовой доли активного кислорода в миллиграммах на килограмм масла.

Метод определения перекисного числа в маслах растительных основан на окислении йодистого калия перекисями и гидроперекисями, содержащимися в образце, в растворе уксусной кислоты и хлороформа и титровании выделившегося йода раствором тиосульфата натрия.

Пробу отвешивают в колбу. Если колбу нельзя взвесить непосредственно, то испытуемую пробу отвешивают в стаканчике. В случае, если взвешивание проводилось в стаканчике, то его вместе с испытуемой пробой помещают в колбу.

Добавляют 10 см³ хлороформа, быстро растворяют испытуемую пробу, приливают 15 см³ уксусной кислоты и 1 см³ раствора йодистого калия, после чего колбу сразу же закрывают, перемешивают содержимое в течение 1 мин и оставляют на 5 мин в темном месте при температуре 15 – 25°С. Затем добавляют 75 см³ воды, тщательно перемешивают и добавляют пять капель раствора крахмала. Выделившийся йод титруют раствором тиосульфата натрия, используя раствор следующей концентрации в зависимости от предполагаемого значения перекисного числа.

Для каждой испытуемой пробы выполняют два измерения.

3.7.8. Йодометрия. Определение массовой доли крахмала

Метод определения крахмала в продуктах мясных изложены в ГОСТ 10574—2016. Метод основан на окислении альдегидных групп моносахаридов, образующихся при гидролизе крахмала в кислой среде, двухвалентной медью жидкости Фелинга, восстановлении окиси меди в закись и последующем йодометрическом титровании.

В коническую колбу вместимостью 250 см³ помещают 20 г подготовленной пробы, приливают небольшими порциями 80 см³ 10%-ного раствора соляной кислоты, одновременно размешивая пробу стеклянной палочкой. Колбу с содержимым присоединяют к холодильнику, ставят на электроплитку и, подложив под колбу асбестовую сетку, кипятят 15 мин, периодически перемешивая. Затем колбу охлаждают в холодной воде до температуры (20±2) °C.

Содержимое колбы количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 см³, доводят объем жидкости дистиллированной водой до метки, перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр. Попавший в колбу жир должен находиться над меткой.

В мерную колбу вместимостью 50 см³ пипеткой вносят 25 см³ фильтрата, добавляют одну каплю раствора фенолфталеина и нейтрализуют фильтрат 10%-ным раствором гидроокиси натрия до появления красноватой окраски. Затем добавляют по каплям 10%-ный раствор соляной кислоты до исчезновения красноватой окраски и еще 2—3 капли раствора соляной кислоты для обеспечения слабокислой реакции раствора.

Для осветления гидролизата и осаждения белков к раствору в колбе добавляют 1,5 см³ 15%-ного раствора железистосинеродистого калия и 1,5 см³ 30%-ного раствора сернокислого цинка, охлаждают до температуры (20±2) °C, доводят объем раствора дистиллированной водой до метки, перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр. В случае образования пены добавляют одну-две капли серного эфира.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят пипеткой 10 см³ фильтрата (при контрольном определении – 10 см³ дистиллированной воды), добавляют 20 см³ жидкости Фелинга, перемешивают и кипятят 3 мин. После кипячения колбу с содержимым охлаждают холодной водой до температуры (20±2) °C, доводят объем дистиллированной водой до метки, перемешивают и дают осесть выпавшей закиси меди.

В коническую колбу вместимостью 100 см³ вносят пипеткой 20 см³ надосадочной жидкости, последовательно добавляют 10 см³ 30%-ного раствора йодистого калия и 10 см³ 25%-ного раствора серной кислоты. Желтовато-коричневый от выделившегося йода раствор сразу титруют 0,1 моль/дм³ раствором тиосульфата натрия до слабо-желтого окрашивания. Затем добавляют 1 см³ 1%-ного раствора крахмала и продолжают титрование до полного исчезновения синей окраски раствора. Также проводят титрование контрольного раствора.

3.7.9. Йодометрия. Определение редуцирующих веществ в сахаре

Метод определения редуцирующих веществ в сахаре установлены в ГОСТ 12575—2001. Редуцирующие вещества – это сахара (глюкоза, фруктоза, мальтоза и лактоза), восстанавливающие щелочные растворы меди и других поливалентных металлов. Метод основан на восстановлении ионов меди (Сu²⁺) из щелочного раствора Мюллера до гемиоксида меди (Сu₂О) редуцирующими веществами при добавлении избыточного количества раствора йода и титровании избытка его раствором тиосульфата натрия.

Приготовление исходного раствора сахара-сырца. Взвешивают 40 г сахара-сырца с погрешностью ±0,01 г, растворяют в дистиллированной воде, переносят в мерную колбу вместимостью 200 см³, осветляют нейтральным раствором уксуснокислого свинца в количестве от 1,0 до 4,0 см³, проверяя полноту осаждения добавлением одной капли нейтрального раствора уксуснокислого свинца. Доводят объем дистиллированной водой до метки, взбалтывают и фильтруют через бумажный фильтр, покрывая фильтровальную воронку часовым стеклом во избежание испарения и изменения концентрации раствора. Отбирают пипеткой 50 см³ фильтрата, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³, добавляют раствор углекислого натрия с массовой долей 14% в присутствии индикатора фенолфталеина до слабой розовой окраски для удаления избытка уксуснокислого свинца, доводят объем до метки дистиллированной водой, взбалтывают и фильтруют через бумажный фильтр.

Приготовление исходных растворов сахара-песка, сахара-рафинада. Взвешивают 40 г сахара-песка или сахара-рафинада с погрешностью ±0,01 г, растворяют в дистиллированной воде, переносят в мерную колбу вместимостью 200 см³ и доводят объем дистиллированной водой до метки.

Для проведения испытания отбирают 20 см³ исходного раствора, что соответствует 2 г сахара-сырца, или 50 см³ исходного раствора, что соответствует 10 г сахара-песка или сахара-рафинада. Если содержание редуцирующих веществ во взятом объеме раствора сахара-сырца превышает 25 г, отбирают меньший объем раствора.

Раствор помещают в коническую колбу вместимостью 250 см³ (при анализе сахара-сырца содержимое колбы нейтрализуют раствором уксусной кислоты молярной концентрации 5 моль/дм³ в присутствии индикатора фенолфталеина). Объем раствора доводят дистиллированной водой до 100 см³, прибавляют 10 см³ реактива Мюллера, перемешивают и помещают колбу с раствором в кипящую водяную баню на 10 мин ± 5 с. Уровень воды в бане должен быть на 2 см выше уровня раствора в конической колбе. Колба должна быть помещена на подставке так, чтобы она не касалась дна бани. Баня должна иметь такие размеры, чтобы кипение не прерывалось при помещении в нее колбы. После нагревания коническую колбу, накрытую часовым стеклом, во избежание окисления окиси меди кислородом воздуха быстро охлаждают под струей холодной воды без взбалтывания.

После кипячения раствор должен иметь голубовато-зеленоватую окраску. Если раствор оранжевой окраски, опыт повторяют с меньшим количеством фильтрата.

К охлажденному раствору прибавляют 5 см³ раствора уксусной кислоты молярной концентрации 5 моль/дм³ и сразу же раствор йода молярной концентрации 0,0333 моль/дм³ в количестве от 20 до 40 см³. Оба раствора добавляют без взбалтывания во избежание окисления окиси меди кислородом воздуха. Колбу закрывают и содержимое взбалтывают до полного растворения осадка, при этом раствор имеет коричневую окраску, обусловленную избытком йода, и оставляют на 2 мин. Затем добавляют 2 см³ раствора крахмала массовой долей 1% и титруют раствором тиосульфата натрия молярной концентрации 0,0333 моль/дм³ до исчезновения синей окраски раствора.

Проводят контрольное определение, используя те же реактивы и в тех же количествах, но вместо испытуемого раствора добавляют дистиллированную воду. Контрольное определение проводят для каждого свежеприготовленного реактива Мюллера. Параллельно проводят опыт без нагревания, используя то же количество исходного раствора и те же реактивы (после добавления реактива Мюллера раствор оставляют на 10 мин).

3.7.10. Йодометрия. Определение содержания кофеина в чае

Метод определения содержания кофеина в чае установлен в ГОСТ 19885—74. Метод основан на быстром извлечении хлороформом кофеина из предварительно нагретого и обработанного водным аммиаком материала.

Подготовка к испытанию. 2,5 г предварительно измельченной навески чая, взятой из средней пробы, с погрешностью взвешивания не более 0,0002 г, помещают в колбу вместимостью 250 см³, прибавляют 6 г кварцевого песка и перемешивают.

Проведение испытания. Колбу ставят на кипящую водяную баню на 2 мин, затем прибавляют 10—15 см³ 25%-ного раствора аммиака до полного смачивания материала. Через 5 мин прибавляют 90 см³ хлороформа и кипятят с обратным холодильником в течение 15 мин.

После охлаждения жидкость фильтруют через вату в колбу вместимостью 250 см³, содержащую 0,6 г алюмокалиевых квасцов в порошке и 2 г вазелина. Оставшийся после экстракции материал промывают семь раз, используя для этого 30 см³ хлороформа, после чего хлороформ сливают в колбу, содержащую квасцы и вазелин.

Обесцвеченную жидкость фильтруют через смоченную водой вату в делительную воронку вместимостью 250 см³, а колбу промывают три раза водой по 10 см³, которую сливают через ту же вату и в ту же делительную воронку.

К собранной в делительной воронке жидкости добавляют 3 см³ 25%-ного раствора едкого кали, 10—15 капель 2%-ного раствора марганцовокислого калия, 30 см³ хлороформа и взбалтывают в течение 3 мин (в случае образования эмульсии увеличивают количество хлороформа).

Хлороформ сливают через смоченный этим же раствором фильтр в колбу и взбалтывание жидкости в делительной воронке повторяют еще три раза, беря каждый раз по 20 см³ хлороформа. Хлороформ отгоняют, остаток в колбе растворяют в 5 см³ 10%-ного раствора серной кислоты, профильтровывают через маленький бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 50 см³. Колбу с остатком кофеина промывают еще три раза 5 см³ 10%-ного раствора серной кислоты, которую фильтруют через тот же фильтр в ту же колбу. Затем прибавляют 25 см³ 0,1 Н раствора йода, содержимое колбы доливают до метки дистиллированной водой, хорошо перемешивают и оставляют в прохладном месте на 20—30 мин до полного осаждения периодида.

Йодный раствор осторожно фильтруют через небольшой кусочек ваты в сухую колбу вместимостью 100 см³ (фильтрат должен быть прозрачным), причем первые порции фильтрата отбрасывают. 25 см³ фильтрата титруют 0,1 Н раствором тиосульфата натрия. За результат анализа принимают среднее арифметическое двух параллельных определений.