Текст книги "Высокодисперсные коллоидные системы и меланины чаги"

Водные извлечения чаги

Основным отличительным свойством чаги от других трутовиков является большое количество в ней водорастворимых веществ [56]. Основным компонентом водных извлечений из чаги являлся меланин, количество которого составляет 50-60 % от их сухого остатка [56-57,147, 159].

Зольные элементы в препаратах чаги составляют почти 28-30 % от сухого остатка препаратов чаги. Они представлены: SiO₂ – 1,64 %; R₂O₃ – 0,38 %; MgO – 1,86 %; CaO – следы; Mn₂O₃ – 1,04 %; Na₂O – 13,32 %; K₂O – 62,70 % от всей золы[55]. В другом исследовании показано наличие в водных извлечениях чаги K 55,0 мг/г, Mg 2,1 мг/г, Na 0,18 мг/г, Ca 0,39 мг/г, Mg 0,15 мг/г, Zn 0,1 мг/г, Al 0,052 мг/г, Fe 0,035 мг/г, B 0,033 мг/г, Ba 0,011 мг/г, Сu 0,0079 мг/г и Cd, Cr, Ni, Pb в следовых количествах [15]. При этом показано, что практически все соли калия, натрия и большая часть катионов магния, марганца переходят из сырья в водный экстракт чаги.

При проведении водной экстракции чаги без предварительного обезжиривания сырья, в целом, количество извлекаемых веществ и их качественный состав существенно не изменяется. Снижается количество птериновых соединений, а также стеринов и тритерпенов [146]. Алкалоидов в водном извлечении чаги не обнаружено [139, 159].

П.А. Якимов [160] охарактеризовал водные извлечения чаги как коллоидные полидисперсные гидрофильные системы, дисперсная фаза которых представлена полифенолоксикарбоновым комплексом – меланином. Агрегативная устойчивость лиофильных коллоидных систем не остается постоянной. Уже при не длительном хранении водных коллоидных систем самопроизвольно возникают явления агрегации, которые ведут к последовательной седиментации потерявших кинетическую устойчивость укрупненных коллоидных частиц.

Для оценки содержания меланина в получаемых водных извлечениях практическое применение имеет его осаждение соляной кислотой. Именно с количественным содержанием меланина в водном извлечении чаги связывают терапевтическую эффективность фармакологических препаратов, получаемых на его основе [53,161]. Агрегативная устойчивость меланина резко снижается при изменении значения рН водного извлечения добавлением других минеральных и некоторых органических кислот [64]. Показано, что с помощью добавления различного количества кислоты можно получить различные фракции дисперсной фазы. При изменении исходного значения рН с 5,9 до 4,7 наблюдается выпадение темноокрашенной части осадка. Повторное подкисление фильтрата позволяет получить из него менее окрашенные фракции. Каждая из примененных минеральных кислот полностью осаждала меланин при значении рН среды, равной 2,2 и ниже. Щавелевая кислота даже при рН среды 1,9 осаждала две трети меланина, уксусная кислота не осаждала его совсем.

Процесс седиментации дисперсной фазы может быть проведён добавлением к водному извлечению чаги специально подобранных электролитов из числа нейтральных солей [64]. Авторами проведено исследование агрегативной устойчивости коллоидной системы водного извлечения чаги с содержанием сухих веществ 1,2 % растворами солевых электролитов различной концентрации. При применении максимальной концентрации раствора хлористого натрия (32 %) в осадок выпадало только 44,1 % меланина, что может свидетельствовать об относительно высокой устойчивости дисперсной фазы водного извлечения чаги к нейтральным солям одновалентных катионов. При добавлении 8 % раствора хлористого кальция из водной вытяжки чаги осаждалось почти в 2 раза больше меланина, чем при добавлении насыщенного раствора хлорида натрия. Применение в качестве осаждающего агента раствора алюмокалиевых квасцов в той же концентрации (8 %) вызывало почти полное осаждении меланина (98,72 %). Растворы уксуснокислого свинца даже в незначительной концентрации (2 %) осаждали меланин полностью (98,90 %).

Для определения отличий в структурной организации коллоидных систем водных извлечений, полученных различными способами экстракции, они были исследованы с помощью ЯМР-релаксации. [162] Данный метод позволяет определить относительные изменения в строении и молекулярной подвижности компонентов меланина в зависимости от его состояния (в сырье, в водном извлечении, в твердом состоянии). На рисунке 4 представлены температурные зависимости спин-решеточной релаксации (Т₁) водных извлечений чаги, полученных различными методами экстракции: реперколяцией, ремацерацией и с механическим перемешиванием среды [162, 243-248]. Времена спин-спиновой релаксации (Т₂) исследуемых образцов меняются аналогично (Т₁), и поэтому не приводятся. Как видно на рисунке 5, условная ширина спектров времен корреляции Δ (Δ~Т₁/Т₂) меняется с температурой по экстремальному закону с общим максимумом для образцов, получаемых методами ремацерации (система 1) и реперколяции (система 2) в области 50 ºС, а при использовании механического перемешивания (система 3) в области 60÷70 ºС. Согласно полученным результатам, каждый из применённых способов экстракции приводит к формированию индивидуальной коллоидной системы с соответствующими значениями параметров релаксации.

Анализ данных в области 70 ºС (температуры проведения экстракции) показывает, что релаксационные характеристики коллоидной системы 2 могут быть представлены как среднее значение соответствующих параметров для систем 1 и 3 (рисунки 4 и 5) [192].

Рисунок 4 Температурная зависимость времен спин-решеточной релаксации водных извлечений чаги.

1 – механическое перемешивание;

2 – ремацерация;

3 – реперколяция.

Рисунок 5 Температурная зависимость условной ширины спектра времен корреляции водных извлечений чаги (Δ=Т₁/Т₂).

1 – механическое перемешивание;

2 – ремацерация;

3 – реперколяция.

Это позволяет предположить, что структурно-конформационный состав полимерной компоненты системы 2 представляет собой суперпозицию структурно-конформационных особенностей полимерных компонент систем 1 и 3. С увеличением температуры, как правило, происходит гомогенизация системы по молекулярной подвижности и, соответственно, падает величина Δ. Но судя по рисунку 5, до температуры 50 ºС у системы 2 и 3 и до 60÷70 ºС у системы 1 ширина спектра времен корреляции Δ возрастает, что можно объяснить ростом объема межмолекулярных взаимодействий в коллоидной системе, например, вследствие набухания полимерной компоненты.

Этот процесс протекает наиболее интенсивно в системе 2 и наименее эффективен для системы 3. Однако процесс гомогенизации в водных извлечениях по молекулярной подвижности наиболее легко протекает для системы 3 и с максимальными энергетическими затратами для системы 1 (рисунок 5). По эффективности процесса набухания полимерной компоненты (по объему и энергетическим затратам), по параметру однородности и молекулярной подвижности дисперсной фазы исследуемые системы можно расположить в следующем порядке: 1 < 3 << 2. Эта зависимость количественных характеристик водных извлечений и молекулярной подвижности дисперсной фазы Δ при использовании различных способов получения водных извлечений приведена на схеме рисунка 6.

Способ получения водного извлечения

Рисунок 6 Схема изменения молекулярной подвижности дисперсной фазы Δ=Т₁/Т₂

Рисунок 7 Температурная зависимость параметров спин-спиновой релаксации меланинов водных извлечений чаги.

а) времена релаксации линии ЯМР Лоренцевой формы: 1 – механическое перемешивание; 2 – ремацерация; 3 – реперколяция; 4 – Т₂₁ время релаксации длинной компоненты; 5 – Т₂₂ время релаксации короткой компоненты 6 – Т₂₁ время релаксации длинной компонент; 7 – Т₂₂ время релаксации короткой компоненты.

б) населенности соответствующих компонент ССИ: 1 – короткая компонента ССИ (Р₂); 2 – длинная компонента ССИ (Р₁); 3 – короткая компонента ССИ; 4 – длинная компонента ССИ.

Наблюдаемая корреляция релаксационных параметров водных извлечений показывает, что мы имеем дело с изменением конформационной структуры полимеров меланина, а не с особенностями механизмов релаксации, обусловленных присутствием жидкофазной компоненты в анализируемых коллоидных системах (рисунок 6).

Проведены исследования меланинов в твердом состоянии, которые выделены из водных извлечений. Меланин, выделенный из водного извлечения, полученного реперколяцией, обозначен как образец 1, ремацерацией – как образец 2 и с помощью перемешивания – как образец 3. Параметры релаксации, у образца 2, как и в дисперсионной среде, представляют собой некую среднюю величину по сравнению с аналогичными параметрами образцов 1 и 3 (рисунок 7).

При этом только у образца 2 в области повышенных температур не наблюдается расслоения по молекулярной подвижности. Подобное расслоение для образцов 1 и 3 свидетельствует о значительно более широком распределении в них полимерной компоненты по молекулярной массе или составу.

Анализ колодных систем, на основании рисунка 5, позволяет заключить, что колодная система водного извлечения, полученного ремацерацией, характеризуется относительной легкостью набухания в воде (гидрофильностью), а результаты, приведенные на рисунке 7, позволяют отметить, что меланин в ней имеет одновременно – максимально плотную и/или однородную упаковку индивидуальных полимерных цепей. Это может быть связано с большим вкладом однородных высокомолекулярных линейных фрагментов в полимерную структуру меланина, а также подразумевает возможность формирования значительного числа жесткоцепных упорядоченных фрагментов в его составе. Хотя строгого отнесения полимеров, входящих в состав меланина и вносящих вклад в формирование его структуры, по проведенным исследованиям сделать невозможно, но хочется напомнить об основных полимерах, входящих в состав всех меланинов, в том числе и меланина чаги, – это полисхариды и белки. Согласно полученным данным, можно заключить, что образуемая в составе водного извлечения макромолекулярная структура меланина обусловлена его состоянием в золе водного извлечения и зависит от способа получения золя. [162,169,170].

Согласно релаксационным характеристикам, сырьё чаги по молекулярной подвижности имеет двухкомпонентную структуру (таблица 1) [171]. Обе компоненты соответствуют жесткоцепным полимерным формам, однако имеют существенные различия. Длинная компонента, описываемая временем спин-спиновой релаксации Т₂₁, отвечает за состояние менее упорядоченной протонсодержащей структурной компоненты. Короткое время Т₂₂ характеризует состояние более упорядоченной компоненты. Во всех исследованных партиях сырья более жесткая компонента составляет около двух третей (в среднем 66 %) от общего количества протонсодержащего вещества, а менее жесткая компонента с более развитым молекулярным движением – приблизительно одну треть общего объема (в среднем 34 %). Качественно аналогичная картина наблюдается у всех меланинов (таблица 1). Принято считать, что основу меланина составляет трехмерный полимер нерегулярного строения, имеющий в своем составе остатки сиреневой, параоксибензойной, ванилиновой, галловой и протокатеховой кислот и их производных [43, 44, 147], в его состав еще входят белки [172] и полисахариды [173,174]. Следовательно, этот метод исследования также ставит под сомнение существование в меланине трехмерного полимера нерегулярного строения.

Таблица 1 Параметры ЯМР релаксации сырья и выделенного из него меланина

Наличие в сырье и в составе меланина полимерных структур, отличающихся по своей структурной организации, могут быть различно связаны или ассоциированы в этих объектах исследования. Обе жесткоцепные полимерные формы присутствуют как в сырье, так и в меланине [168, 171]. Длинные времена Т₂₁ в меланине в среднем существенно ниже, чем в исходном сырье, при этом в меланине заметно возрастает средняя доля полимеров с менее упорядоченной протонсодержащей структурой. Эти данные хорошо согласуются с изменением упаковки компонентов в меланине по сравнению с их упаковкой в сырье, поскольку меланин в дисперсионной среде извлечения будет несколко изменяться под её воздействием (образование двойного электриеского слоя, изменение заряда частицы ит.п.).

Таблица 2 Разница в населенностях длинной компоненты ССИ у меланина и исходного сырья общего происхождения

Наибольшие различия в количестве и качестве более подвижной компоненты в меланине по сравнению с чагой, из которой он был выделен, наблюдаются для партий сырья III, IV (таблице 2) [171]. Наименьшим изменениям подвергается меланин (при проведении экстракции и выделении) из партии сырья VIII. Промежуточное положение занимают меланины, полученные из V, VI и VII партий сырья.

Согласно данным о зольности водных извлечений (таблица 3), наблюдается хорошая корреляция обсуждаемых параметров с зольностью водных извлечений и содержанием в них полисахаридов. Водные извлечения, полученные из V, VI и VII партий сырья, имеют самое высокое содержание зольных элементов и полисахаридов. Более высокое содержание меланина наблюдается у извлечения, полученного из V партии сырья, причём длинная и короткая компоненты ССИ как у сырья, так и у меланнина этого образца максимальны среди исследованных партий сырья, в том числе и по сравнению с партиями сырья VI и VII.

Вероятно, поэтому выход меланина на 5-6 % выше при экстракции сырья партии V, чем из VI и VII. Водные извлечения из партий сырья III, IV имеют близкие значения зольности и количества полисахаридов. Их концентрация в извлечениях ниже по сравнению с извлечениями из партий сырья V и VI. При почти равном количестве полисахаридов и меланина в водном извлечении из партии сырья VIII, по сравнению с извлечениями из партий сырья III и IV, его зольность ниже. По всей видимости, при экстракции определенное содержание зольных элементов в извлечении способствует формированию золя и влияет на компоновку в нем меланина.

Таблица 3 Физико-химические характеристики водных извлечений чаги, полученных ремацерацией из сырья разных партий

На основании полученных результатов трудно приписать короткую и длинную компоненты к конкретному типу структурных фрагментов полимера в сырье и меланине, поскольку эти полимеры по-разному организованы в сырье, водном извлечении и меланине. В целом, состав полимерных компонентов у всех видов сырья в основном одинаков, но каждый из них отличается по степени их доступности.

Анализ углеводной компоненты водных извлечений [243,244,252-255] показывает, что содержание в них углеводов, представленных полисахаридами, также зависит от способа их получения. Максимальное содержание углеводов наблюдается в извлечениях, полученных ремацерацией (таблица 4). Анализ углеводов в фильтрате (таблица 4) показывает, что основная их часть переходит в состав меланина при его выделении хлористоводородной кислотой, вне зависимости от примененного способа экстракции.

Таблица 4 Физико-химические показатели водных извлечений чаги, полученных разными способами экстракции

Примечание: * – РЕМ – ремацерация, РЕП – реперколяция, МП – при механическом перемешивании; ** – количество углеводов, перешедшее в состав меланина при его осаждении хлористоводородной кислотой.

Интересные данные получены по высвобождению углеводной компоненты при щелочном гидролизе меланинов (температура проведения гидролиза – 80-90 ºС, концентрация гидроокиси натрия – 10 %, время проведения гидролиза 15 часов). На зависимости количества высвобождаемых из матрицы меланина углеводов от времени проведения гидролиза наблюдалось два максимума (таблица 5), что можно объяснить тем, что они по-разному интегрированы с компонентами меланина. Первый максимум (5 час) можно объяснить разрушением полисахаридов, слабо связанных с матрицей меланина или физически адсорбированных ею. Вероятно, сюда можно отнести и те полисахариды, которые были ассимилированы меланином при его осаждении.

Таблица 5 Содержание связанных углеводов полифенольного комплекса

Из данных, приведенных в таблицах 4 и 5, видно, что выделение углеводов при проведении гидролиза на первом максимуме в два – три раза выше, чем их количество, перешедшее в меланин при его выделении (таблица 4). Второй максимум, приходящийся на 11-13 часов гидролиза, характеризует более глубокую деградацию меланина и разрушение полисахаридов, более прочно связанных с его матрицей. Общее количество углеводов в меланинах, полученных разными способами экстракции, сильно отличается между собой, что указывает на различия в их строении. Cодержание углеводов в меланине, полученном реперколяцией и при перемешивании, ниже, чем в меланине, полученном ремацерацией. Это косвенно доказывает, что первые имеют более плотную структуру, более конденсированы, чем последний.

АОА водных извлечений, полученных с применением различных способов экстракции, приведена в таблице 6.

Таблица 6 Антиоксидантная активность объектов исследования, полученных разными способами экстрагирования

Примечание: * – неизвестно

Максимальное значение АОА имеет водное извлечение, полученное при механическом перемешивании. Водные извлечения, полученные методом ремацерации, обладают более высокой АОА по сравнению с водными извлечениями, полученными реперколяцией, и практически втрое превышают АОА настоя чаги. Низкое значение АОА настоя чаги, которое приведено авторами [175], можно объяснить тем, что его получали при кипячении в течение 15 минут с последующим настаиванием в течение 45 минут. Известно [57, 62], что при повышении температуры экстракции происходят глубокие, необратимые изменения меланина. Это приводит к конденсации меланина и снижении его устойчивости в растворе. Об этом свидетельствует увеличение содержания углерода и снижение количества функциональных групп.

Установлено, что описанные изменения в структуре меланина приводят к уменьшению терапевтической активности водных извлечений из чаги. Вероятно, в случае более конденсированного комплекса уменьшается количество участков комплекса, способных проявлять АОА. Самой высокой АОА должны обладать водные извлечения, полученные ремацерацией, поскольку при применении этого способа экстракции извлекается максимальное количество меланина, который считается основным действующим веществом извлечений [176]. Однако АОА у водного извлечения, полученного при механическом перемешивании, значительно выше. Вероятно, это связано с тем, что при данном способе экстрагирования происходит интенсификация процесса массопередачи и за счет изменения гидродинамических условий увеличивается скорость экстракции, так как сильно уменьшается слой неподвижной жидкости и появляются конвективные токи, способствующие переносу вещества. Похоже, за счет более быстротекущего процесса происходит извлечение в большей степени низкомолекулярных компонентов, таких например, как фенолы (п-крезол, пирокатехин, резорцин, гидрохинон, α-нафтол), флавоноиды, относящиеся к классам флавонов, флаванонов, катехинов [8], благодаря которым может возрастать АОА водного извлечения. Вероятно, при этом способе экстрагирования происходят более глубокие структурные изменения меланина при выходе из сырья и формировании частиц в дисперсионной среде. Очевидно, с этим связано получение более плотной упаковки меланина в золе водного извлечения [169].

Приведенные результаты по АОА водных извлечений хорошо согласуются с данными, полученными Накаямой с соавторами [177], которые исследовали АОА водных отваров и метанольных экстрактов из чаги. На основании отличия антиоксидантной активности метанольных экстрактов FB и ST частей чаги в отношении супероксид радикала и гидроксильного радикала сделан вывод о том, что источники антиоксидантной активности различаются в FB и ST частях чаги. Экстракты с концентрацией метанола 80 % из FB части чаги обладают активностью, находящейся на одном уровне с отварами из чаги. Определен состав 80 % метанольного экстракта FB части чаги. С помощью масс спектроскопии идентифицированы фенольные соединения: 2,5-дигидрокситерефталевая, протокатеховая, кофейная и сиреневая кислоты, 3,4-дигидробензальдегид, 4-гидрокси-3,5диметокси 2-гидрокси-1-гидроксиметиловый эфир бензойной кислоты (BAEE) и 3,4–дигидроксибензацетон. Часть соединений во фракциях, обладающих высокой антиоксидантной активностью, идентифицировать не удалось. Такие соединения, как BAEE и 2,5-дигидрокситерефталевая кислота, определены в чаге впервые. Авторы полагают, что среди этих семи соединений протокатеховая кислота, 3,4-дигидробензальдегид и 3,4–дигидроксибензацетон вносят основной вклад в антиоксидантный потенциал 80 % метанольного экстракта FB части чаги. Среди них 3,4–дигидроксибензацетон можно считать основным источником антиоксидантной активности, поскольку его содержание в экстракте было приблизительно в два раза выше, чем других компонентов. Содержание в обоих 80 % метанольных экстрактах FB и ST частей чаги 3,4дигидробензальдегида и протокатеховой кислоты PCA превалировало над другими компонентами. Идентифицировать эти семь фенольных соединений в отварах обоих ST и FB частях в столь же значительных количествах не удалось, тем не менее их антиоксидантный потенциал был таким же высоким, как и 80 % метанольных экстрактов. Авторы предположили, что источником антиоксидантной активности в отварах могут быть другие вещества, такие, как меланин, или другие полимеры, состоящие из фенолов.

Теми же авторами проведено сравнение антиоксидантной активности извлечений, полученных из чаги, с извлечениями из других грибов Agaricus blazei Mycelia, Phellinus linteus, Ganoderma lucidum, используемых в народной медицине в качестве антиканцерогенных и противовоспалительных средств. Полученные результаты показали, что отвары чаги имели самую высокую антиоксидантную активность среди отваров других исследованных грибов, особенно по активности в отношении супероксид радикала (O2·). Активность чаги в отношении супероксид радикала составляла 35 г сухого гриба/мл, в то время как у следующего за ним по активности Phellinus linteus 1306 г сухого гриба/мл. Активность в отношении гидроксильного радикала (·OH) также была выше у чаги по сравнению с другими грибами в 2 – 8 раз.

Исследование АОА водных извлечений, полученных из различных партий сырья чаги ремацерацией, позволило установить, что она зависит от содержания в золе дисперсной фазы – меланина, выделяемого с помощью хлористоводородной кислоты (таблица 7) [176]. С увеличением этой фракции дисперсной фазы в золе с 9,30 до 13,20 % наблюдается снижение АОА водных извлечений. Причём разница в изменении содержания меланина в водном извлечении на 3,9 % приводит к снижению АОА в три раза. АОА меланинов, исследованная в водном растворе, имеет тенденцию к увеличению по сравнению с АОА соответствующего водного извлечения. Вероятно, это связано с иной стабилизацией меланина и его пространственной структуры в воде по сравнению с золем водного извлечения чаги, более насыщенным соединениями, участвующими в его стабилизации.

Таблица 7 АОА водных извлечений и меланинов чаги, полученных из сырья разных партий

Примечание: * – приведены в приложении, ** – не определено, *** – не растворился.

Для коллоидных систем одной из главных характеристик является размер и распределение по размерам дисперсной фазы. Эта характеристика может иметь решающее значение в проявлении физико-химических свойств водных извлечений чаги и меланина. Водные извлечения, полученные из двух партий сырья чаги (XI и XII), имеют близкое содержание сухих остатков – 1,7230 г и 1,7028 г, зольность – 0,3648 г и 0,3720 г и отличаются по содержанию полифенолоксикарбонового комплекса – 1,0650 г и 1,3200 г. (Здесь и далее приводится выход экстрактивных веществ, полученный из 10 г сырья). Для оценки изменений, происходящих в коллоидной системе водного извлечения чаги со снижением в ней содержания меланина, определена электропроводность образцов, получаемых при разбавлении водного извлечения чаги. [263]. По перегибам на зависимостях электропроводность – концентрация меланина определены критические концентрации (С_кр), приведенные в таблице 8.

Таблица 8 Значения критических концентраций (С_кр) для коллоидных систем водных извлечений чаги

Отличие значений С_кр свидетельствует о различной организации коллоидных систем водных извлечений, полученных из разных партий сырья чаги.

Размер частиц дисперсных фаз коллоидных систем водных извлечений чаги определён методом ФКС в концентрациях меланина, близких к С_кр. Как показано на рисунках 8 и 9, в водном извлечении при содержании в нём меланина в концентрации, близкой к С_кр, происходит изменение содержания частиц дисперсной фазы и их размеров. При разбавлении в водных извлечениях, полученных из двух разных образцов сырья чаги, в некоторых диапазонах концентрации меланина происходит отделение от крупных частиц более мелких частиц, достаточно близких по размеру [178-180]. При этом в водных извлечениях, полученных из разных партий сырья, изменения размеров частиц дисперсной фазы в диапазоне, близком к С_кр, протекает различно. В водном извлечении, полученном из первого сырья, процессы агрегации и дезагрегации частиц приводят к большим изменениям размеров крупных частиц, что проиллюстрировано на рисунке 8.

Рисунок 8 Эффективный радиус (нм) частиц дисперсной фазы коллоидной системы водного извлечения чаги из XI партии сырья.

Содержание меланина (по оси абсцисс): 1 – 0,0017 мг/мл; 2 – 0,0068 мг/мл; 3 – 0,11 мг/мл; 4 – 0,43 мг/мл; 5 – 7,00 мг/мл

Рисунок 9 Эффективный радиус (нм) частиц дисперсной фазы коллоидной системы водного извлечения чаги из XII партии сырья.

Содержание меланина (по оси абсцисс): 1 – 0,0028 мг/мл; 2 – 0,0053 мг/мл; 3 – 0,03 мг/мл; 4 – 1,08 мг/мл; 5 – 8,7 мг/мл

Процессы агрегирования частиц преобладают в концентрациях после С_{кр 2} и С_{кр 3} (при концентрации меланина – 0,11 мг/мл и 0,43 мг/мл). Происходит увеличение размера крупных частиц меланина. В низких концентрациях (0,0068 мг/мл и 0,0017 мг/мл) наблюдается уменьшение размеров крупных частиц меланина до размера R_эфф = 55нм. В водном извлечении, полученном из второго сырья, частицы меланина крупнее, чем в первом. Процессы изменения частиц в этой коллоидной системе отличаются от ранее рассмотренной системы, что проиллюстрировано на рисунке 9.

В среднем, размер крупных частиц меланина водных извлечений чаги имеют радиус от 60 до 160 нм. В водном извлечении, полученном из второго образца сырья, – они крупнее, их радиус составляет 150-160нм [178].

Сопоставление АОА соответствующих водных извлечений и меланинов (таблица 7) с размерами частиц меланина в коллоидных системах, полученных из XI и XII партий сырья чаги, позволяет отметить, что наблюдается увеличение АОА водного извлечения чаги и меланина с уменьшением размера частиц дисперсной фазы [176].