Текст книги "Медицинская паразитология с энтомологией"

Специфические методы гельминтологических исследований

Гельминтологические исследования проводятся с целью диагностики гельминтозов путем обнаружения в патологическом материале яиц, личинок, взрослых гельминтов или их фрагментов. Поскольку большинство гельминтов в половозрелой стадии развития находится в желудочно-кишечном тракте или в сообщающихся с ним органах, чаще всего применяются макро– и микрогельминтоскопические методы исследования фекалий (не более суточной давности).

Метод отстаивания. Суточную порцию фекалий тщательно перемешивают с 5-10-кратным количеством воды, сливают в высокие стеклянные цилиндры и оставляют до полного осаждения взвешенных частиц. Верхний мутный слой осторожно сливают и доливают чистую воду доверху, повторяя это несколько раз, пока вода над осадком не станет прозрачной. Слив верхний слой, переносят осадок в чашку Петри и на темном фоне просматривают его под лупой или невооруженным глазом.

Метод отсеивания. Перемешанные с водой фекалии помещают на верхнее сито прибора, состоящего из системы сит с отверстиями убывающего диаметра, прибор соединяют с водопроводной сетью и, открыв водопроводный кран, промывают, а вытекающую жидкость отводят в канализацию. Крупные гельминты остаются на верхнем сите, а более мелкие задерживаются на нижних. Сита переворачивают и, смыв содержимое в чашки Петри, просматривают невооруженным глазом или под лупой.

Используют гельминтоовоскопические и гельминтоларво-скопические методы с целью обнаружения яиц гельминтов и их личинок.

Гельминтоовоскопические методы

При использовании гельминтоовоскопических методов обнаружения гельминтов вначале готовят двоякого рода мазки – нативный и толстый.

Нативный мазок. Небольшое количество фекалий растирают на предметном стекле в капле 50 %-ного раствора глицерина или кипяченой воды. Крупные частицы осторожно удаляют, смесь накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом (просматривают два мазка).

Удобнее и проще готовить длинные мазки между двумя предметными стеклами. Делая нативный мазок, следует знать, что при слабых инвазиях в нем редко обнаруживаются яйца гельминтов.

Толстый мазок с целлофаном по Като. Кусочки гидрофильного целлофана (размером 4x2 см) замачивают на 24 ч в смеси глицерина (50 мл) и 6 %-ного раствора фенола (500 мл). Около 100 мг фекалий растирают на предметном стекле и, покрывая кусочком влажного целлофана, придавливают резиновой пробкой № 5. Препарат исследуют через 30–60 мин, когда он слегка подсохнет и просветлится, вследствие чего яйца гельминтов легко обнаружатся под малым увеличением микроскопа.

Методы обогащения

Среди методов обогащения используют методы флотации (всплывания) и седиментации (осаждения).

Методы флотации основаны на применении насыщенных растворов различных химических веществ, в которых яйца всплывают благодаря разнице удельного веса.

Метод Кофоида – Барбера в модификации Фюллеборна. Вначале готовят насыщенный раствор поваренной соли, растворяя ее в количестве 400 г в 1 л горячей воды. Получив раствор с удельным весом 1,18, переносят его в объеме 100 мл в высокую и узкую баночку на 100 мл и тщательно размешивают в ней деревянной палочкой 5 г фекалий. Всплывшие на поверхность крупные частицы быстро удаляют палочкой или кусочком бумаги. После отстаивания смеси в течение 45–90 мин проволочной петлей диаметром 0,8–1 см снимают поверхностную пленку, перенося ее на предметное стекло. При исследовании на яйца анкилостомид смесь отстаивают 10–15 мин. Можно снимать пленку непосредственно предметным стеклом, которым покрывают баночку так, чтобы оно соприкасалось с жидкостью (насыщенный раствор соли доливают до краев баночки). После отстаивания предметное стекло снимают, быстро переворачивают и исследуют под микроскопом (без покровного стекла) приставшую к нему пленку с яйцами гельминтов. Данный метод хорошо выявляет яйца нематод и карликового цепня. Тяжелые яйца трематод, большинства цестод и неоплодотворенных аскарид всплывают плохо, поэтому исследуют и осадок. Для этого после снятия пленки жидкость из баночки быстро сливают и из осадка петлей или пипеткой берут несколько капель, переносят их на предметное стекло, добавляют каплю глицерина для просветления и исследуют под микроскопом.

Метод Калантарян. Методом Калантарян яйца гельминтов обнаруживаются в фекалиях намного лучше, чем предыдущим способом. Вместо изотонического раствора хлористого натрия применяется насыщенный раствор азотнокислого натрия с удельным весом 1,39. При этом один объем азотнокислого натрия растворяют в равном объеме воды при кипячении, а пленку снимают через 20–30 мин.

Метод осаждения (седиментации) яиц гельминтов основан на использовании химических веществ, растворяющих жиры и белки фекалий.

Метод седиментации Телеманна в модификации Миягавы. Около 5 г фекалий растирают в ступке или баночке, добавив по 5 мл этилового эфира и 50 %-ного раствора соляной кислоты; смесь процеживают через проволочное или волосяное сито в пробирку и центрифугируют. В пробирке образуется три слоя: верхний – эфир с растворенным жиром; средний – соляная кислота с растворенными белковыми веществами; нижний (осадочный) – нерастворимые части фекалий с яйцами гельминтов. Верхние слои сливают, а к осадку добавляют воду и центрифугируют. Несколько капель осадка переносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом. Этим методом можно обнаружить яйца всех видов гельминтов, но иногда, к сожалению, они деформируются.

Консерванты фекалий. Фекалии для исследования берут порциями в количестве 50 г и в чистой стеклянной или пластмассовой посуде с плотной крышкой направляют в лабораторию.

Для их консервирования предложен ряд растворов: 4-10 %-ный раствор формалина, который для предупреждения развития яиц анкилостомид необходимо подогреть до температуры 50–60 °C; смесь 0,2 %-ного водного раствора азотнокислого натрия (1900 мл), раствора Люголя (5 г йода, 10 г йодистого калия, 250 мл воды), формалина (300 мл) и глицерина (25 мл), в которой яйца гельминтов сохраняются 6–8 мес.; смесь глицерина (5 мл), формалина (5 мл) и воды (100 мл); 1–1,5 %-ные растворы детергентов – моющих средств (по массе соотношение фекалий и раствора детергента 1:5); смесь мертиолата 1:1000 (200 мл), формалина (25 мл), глицерина (5 мл), дестиллированной воды (250 мл) с добавлением 0,6 мл раствора Люголя (из расчета 1 г фекалий на 10 мл смеси).

Гельминтоларвоскопические методы

Метод Берманна. 5-10 г свежевыделенных фекалий помещают на металлической сетке в стеклянную воронку, на узкий конец которой надета резиновая трубка с зажимом. Во избежание загрязнения осадка частицами кала рекомендуется подкладывать (на сетку) бумагу или добавлять в фекалии животный уголь или кукурузную муку. Воронку наполняют теплой водой (45–50 °C) до соприкосновения с фекалиями. В силу термотропности личинки активно перемещаются в теплую воду и постепенно скапливаются в нижней части воронки над зажимом. Через 3–4 ч зажим открывают, жидкость спускают в 1–2 пробирки, центрифугируют в течение 2–3 мин, верхний слой сливают, а осадок исследуют на предметном стекле под микроскопом.

Метод культивирования личинок анкилостомид на фильтровальной бумаге. Около 0,5 г свежих фекалий наносят на полоску фильтровальной бумаги 15x150 мм так, чтобы края полоски оставались свободными. Полоску помещают в пробирку диаметром 18 мм, содержащую 3 мл воды, закрывают пробкой и выдерживают при температуре 25 °C в течение 5–7 дней. За это время развившиеся из яиц личинки спускаются по бумаге на дно пробирки. Их убивают нагреванием и осадок исследуют под микроскопом; если точного определения вида паразитов не требуется, пробирки просматривают невооруженным глазом.

Метод выявления мирацидиев шистосом. Фекалии промывают в темноте при температуре 8-10 °C, осадок выдерживают 45 мин на ярком свете при температуре 28 °C, затем переливают в темную колбу с трубочкой сбоку Мирацидии концентрируются в прозрачной боковой трубке, откуда их можно достать.

Исследование дуоденального содержимого и рвотных масс предусматривает обнаружение яиц и личинок гельминтов, паразитирующих в желчных и панкреатических протоках, желчном пузыре, в двенадцатиперстной кишке (яйца описторхисов, фасциол, клонорхисов, анкилостомид, трихостронгилид, личинки стронгилоидов).

В дуоденальном содержимом микро скопируют имеющиеся в нем хлопья и плотные включения, а затем, разлив его по пробиркам, добавляют равный объем серного эфира, центрифугируют и исследуют осадок.

В рвотных массах изредка обнаруживаются гельминты или их фрагменты (например, при прорыве нагноившейся эхинококковой кисты из легкого в бронхи с рвотой выделяется светлая водянистая или гнойная жидкость). Диагноз ставится на основании обнаружения обрывков кутикулярной оболочки, сколексов и крючьев эхинококка.

Исследование мочи. В моче обнаруживают яйца и личинки гельминтов (Schistosoma haematobium), паразитирующих в мочеполовой системе, а также яйца других видов гельминтов, смываемые мочой с загрязненной фекалиями промежности и наружных половых органов. Яйца парагонимуса, обитающего преимущественно в легких, в случае локализации в почке, мочеточниках, стенках мочевого пузыря попадают в мочу. В хилезной моче выявляются микрофилярии.

Около 100 мл исследуемой мочи отстаивают 30 мин в цилиндре и, удалив верхний слой, сливают 10–15 мл осадка в пробирку, центрифугируют при 1500 об/мин в течение 1–2 мин; осадок микроскопируют.

Мочеполовой шистосомоз диагностируют путем выявления мирацидиев. Порцию свежей мочи центрифугируют в течение 5 мин, осадок переливают в окрашенную в черный цвет колбу, к верхней части которой припаяна прозрачная стеклянная трубочка. Добавляют воду в соотношении 1:5; 1:10 и ставят на 2 ч в термостат при температуре 25–30 °C. Вышедшие из яиц мирацидии видны через прозрачную трубочку невооруженным глазом в виде быстро движущихся точек.

При хронической форме шистосомоза у больных к концу мочеиспускания выделяется кровь, но яйца в моче находят редко, вследствие чего рекомендуется прибегать к биопсии мочевого пузыря.

Исследование мокроты. В мокроте могут находиться яйца парагонимусов, шистосом, личинки мигрирующих нематод, фрагменты эхинококкового пузыря.

Всю доставленную порцию мокроты тщательно просматривают невооруженным глазом или под лупой, выбирают и исследуют все видимые обрывки тканей, скопления ржавого цвета; затем мокроту исследуют в нескольких мазках.

Гнойную мокроту заливают равным количеством 0,5 %-ного раствора едкой щелочи, центрифугируют и исследуют осадки. При некоторых гельминтозах в мокроте наблюдаются характерные изменения. При парагонимозе, например, в мокроте можно обнаружить скопления яиц в виде желтоватых комочков.

Исследование содержимого абсцессов и пунктатов. В гнойных выделениях абсцессов или в тканях и кистах, удаленных при оперативном вмешательстве, можно обнаружить фрагменты гельминтов, их личинки и яйца (эхинококк, альвеококк, цистицерк, аскариды, токсокара, парагонимус). Техника исследования обычная; в некоторых случаях из тканей готовят гистологические срезы. Гнойное содержимое можно обработать методом Телеманна; прозрачную жидкость исследуют так же, как и дуоденальное содержимое, добавляя серный эфир. Эхинококковую жидкость центрифугируют и исследуют осадок на наличие сколексов и крючьев; препараты окрашивают по Цилю – Нельсену.

Исследование крови. В крови обнаруживают микрофилярии и личинки мигрирующих нематод. Каплю крови берут из пальца или мочки уха, исследуют в свежем виде или готовят препараты, помещая ее на предметное стекло с нанесенным квадратом из вазелина, и слегка прижимают покровным стеклом. Под микроскопом видны микрофилярии, движущиеся между клетками крови. Кровь допускается помещать между двумя слоями клейкой целлюлозной ленты; микрофилярии сохраняют подвижность в течение 6 ч. Идентифицировать виды микрофилярий можно лишь в окрашенных мазках или толстых каплях. Приготовленные препараты высушивают, гемолизируют и окрашивают по Романовскому – Гимзе или Цилю – Нельсену.

При слабых инвазиях необходимо исследовать 2-10 мл крови с антикоагулянтом (например, с 5 %-ным раствором лимоннокислого натрия) по методу Кнотта в модифицикации Маркелла и Фоге: 2 мл крови перемешивают в центрифужной пробирке с 10 мл 1 %-ной уксусной кислоты, центрифугируют в течение 2 мин при 1500 об/мин; поверхностный слой сливают, осадок распределяют на нескольких предметных стеклах и исследуют под микроскопом. Препараты окрашивают по Романовскому – Гимзе.

Исследование кожных покровов. В коже можно обнаружить микрофилярий онхоцерков и личинок гельминтов животных, вызывающих кожную форму Larva migrans. Срезы кожи или материал, полученный скарификацией, берут в области бедра, икры, ягодицы или на уровне дельтовидной мышцы. Конусообразный кусочек эпидермиса поднимают энтомологической булавкой и, срезав бритвой, исследуют на стекле в капле изотонического раствора хлористого натрия.

При отрицательном результате свежий препарат повторно просматривают через 10 мин; личинки обычно локализуются по краям препарата. Полученный материал можно выдерживать в 2 мл изотонического раствора хлористого натрия в течение 1–2 ч и исследовать осадок. У больного рекомендуют брать 5 срезов кожи.

Компрессионный метод выявления личинок трихинелл. Кусочек двуглавой или икроножной мышцы (вблизи сухожилия), взятой хирургическим путем с соблюдением асептики, расщепляют препаровальными иглами на отдельные тонкие волоконца, сдавливают их между двумя предметными стеклами в капле глицерина так, чтобы препарат был тонким и прозрачным. Под микроскопом с затемненным полем зрения хорошо видны личинки трихинелл. Эффективно исследование нескольких кусочков мышц в компрессориумах, используемых в ветеринарно-санитарной практике, особенно в специальных трихинеллоскопах.

Метод переваривания Берманна: 1 г измельченных мышц заливают 60 мл искусственного желудочного сока (0,5 г пепсина, 0,7 мл концентрированной соляной кислоты, 100 мл воды) и выдерживают 18 ч в термостате при температуре 37 °C; верхний слой жидкости сливают, к осадку добавляют теплой воды (37–45 °C) и выливают в аппарат Берманна. Через 1 ч жидкость спускают в пробирку, центрифугируют и исследуют осадок. Если личинки заключены в обызвествленные капсулы, их предварительно декальцинируют в растворе соляной, азотной или серной кислоты.

Биопроба. Кусочки исследуемых мышц скармливают белым мышам или крысам. Через 2–3 дня можно обнаружить половозрелых трихинелл в дуоденальном содержимом, а через 2–3 недели – их личинки в диафрагме и языке.

Гистологические срезы. Кусочки мышц фиксируют в жидкости Буэна; срезы готовят обычным способом на микротоме и окрашивают их гематоксилином.

Выявление цистицерков. Кусочек экстирпированной мышцы или соединительной ткани осматривают невооруженным глазом, осторожно выделяют цистицерк – беловатый полупрозрачный пузырек размером 1–2 см, раздавливают его между двумя предметными стеклами в капле глицерина и исследуют под микроскопом.

Для определения жизнеспособности выделенных из тканей цистицерков их выдерживают в 50 %-ном растворе желчи на изотоническом растворе хлористого натрия в термостате при температуре 37 °C; через 10–60 мин головка жизнеспособного цистицерка выворачивается наружу.

Обызвествленных цистицерков предварительно декальцинируют 4 %-ным раствором азотной кислоты в течение 1 ч.

Выявление яиц шистосом. При хронических формах шистосомозов, когда образование гранулем препятствует выходу яиц из тканей в просвет кишечника или в мочевыводящие пути, применяют биопсию слизистой оболочки прямой кишки, которую производят специальной ложкой с помощью ректоскопа, выбирая участок с видимым поражением. Биопсированный кусочек раздавливают между двумя предметными стеклами и исследуют под микроскопом. При отрицательном результате кусочки просветляют в 4 %-ном растворе едкой щелочи и готовят из них гистологические срезы.

В ряде случаев мочеполового шистосомоза диагноз может быть поставлен только на основании эндовезикальной биопсии.

При гепатолиенальной форме шистосомоза производят пункционную биопсию печени, из полученного материала готовят гистологические срезы и исследуют их под люминесцентным микроскопом.

При поражении шистосомами женских половых путей выделения собирают с помощью влагалищного зеркала или берут острой ложечкой кусочки слизистой оболочки шейки матки; полученный материал исследуют под микроскопом в капле изотонического раствора хлористого натрия.

Исследование рыбы на зараженность личинками дифиллоботриид и описторха. При этих исследованиях надлежит руководствоваться тем, что носителями личинок возбудителя дифиллоботриоза являются щука, налим, окунь и ерш, а описторхоза – виды рыб семейства карповых.

Важно также представлять, что плероцеркоиды лентеца широкого локализуются в полости тела, икре, внутренних органах, мышцах рыб, а метацеркарии возбудителя описторхоза – в подкожном слое мышц не глубже 2–4 мм, преимущественно на спинной стороне.

Обычно исследуют свежевыловленную рыбу. Перед вскрытием ее отмывают от слизи, протирают, взвешивают, измеряют длину. Вскрывают в большой эмалированной кювете или на широкой гладкой доске.

На предмет обнаружения плероцеркоидов тщательно осматривают все внутренние органы и жировую ткань. Затем приступают к исследованию мускулатуры, разрезая мышцы на пластинки толщиной не более 3–5 мм. И, наконец, выделив плероцеркоиды, изучают их жизнеспособность.

С этой целью извлеченные плероцеркоиды помещают в подогретый изотонический раствор хлористого натрия или в искусственный желудочный сок, осторожно раздражая личинок препаровальной иглой. Даже слабые движения личинок свидетельствуют об их жизнеспособности.

Зрелые метацеркарии описторхиса представляют собой цисту овальной формы, внутри которой находится в согнутом состоянии личинка гельминта. Оболочка цисты двойная: наружная – соединительнотканная, образована за счет тканей хозяина; внутренняя – тонкая, сформированная секретом цистогенных клеток паразита. Внутри цисты личинка описторхиса неподвижна, но периодически совершает маятникообразные движения, хорошо заметные при наблюдении под малым увеличением светового микроскопа.

Личинка гельминта имеет ротовую и брюшную присоски. В задней части ее тела расположен экскреторный пузырь, хорошо заметный в виде темного (иногда почти черного) пятна. Передняя часть тела личинки до уровня брюшной присоски, покрыта мелкими шипиками, разглядеть которые не всегда удается даже при большом увеличении микроскопа.

При выявлении жизнеспособности метацеркариев в тканях рыб используют один из двух методов (морфологический и метод определения подвижности личинок).

При использовании первого метода выделенные из тканей рыб метацеркарии переносят в каплю изотонического раствора хлористого натрия на предметное стекло и исследуют вначале под малым, а затем под большим увеличением микроскопа. Признаком гибели личинок является грубое изменение структуры, явное нарушение целости оболочек цист, зернистый распад ее содержимого, разрушение экскреторного пузыря.

Менее выраженные признаки деструкции не могут служить основанием для признания метацеркариев мертвыми. В этих случаях определяют подвижность метацеркариев. Они, в частности, обладают способностью совершать колебательные движения внутри цисты, усиливающиеся при механическом надавливании на них или подогреве.

При провокации двигательной активности метацеркариев используют химические раздражители. На выделенных метацеркариев наслаивают несколько капель дуоденального содержимого или желчи, полученных при зондировании человека, или же 0,5 %-ного раствора трипсина, приготовленного на изотоническом растворе. Для ускорения эксцистирования личинок можно осторожно подогреть эти растворы над пламенем спиртовки до 36 °C.

Исследование плодоовощной, плодово-ягодной и растительной продукции на яйца гельминтов и цисты протистов. Пробы овощей, плодов, ягод, корнеплодов закладывают в чистые широкогорлые стеклянные банки или эмалированные, пластиковые емкости (типа кастрюль, мисок, кюветов), заполненные водой, объемом 1,5–2,0 л с таким расчетом, чтобы исследуемый материал был полностью погружен в воду и замачивают его на 2 ч. В течение этого времени емкость периодически встряхивают вручную или 5-10 мин в шейкерах (аппараты для встряхивания).

Через 2 ч плоды и овощи обмывают щетками или кисточками, что зависит от их размера, а столовую зелень тщательно прополаскивают. Затем исследуемые плоды, овощи, ягоды или зелень освобождают и промывную воду в течение 1 ч отстаивают.

Надосадочную жидкость осторожно сливают в отдельную емкость и исследуют по методике мембранной фильтрации питьевой и (или) сточной воды в соответствии с МУК 4.2.964-00.

Осадок помещают в центрифужные пробирки, заливают его 3 %-ным раствором щелочи (NaOH или КОН) в соотношении 1:2, тщательно перемешивают стеклянными или деревянными палочками и оставляют на 30 мин. Затем центрифугируют 5 мин при 2000 об/мин и надосадочную жидкость сливают. К осадку в пробирках добавляют один из флотационных растворов (удельный вес 1,38-1,4) в соотношении 1:2 и тщательно перемешивают. Затем пробирки устанавливают в штатив, добавляют в них флотационный раствор до образования выпуклого мениска по краю центрифужной пробирки и накрывают покровным стеклом до соприкосновения с мениском. Оставляют на 20–30 мин. Сняв стеклом пленку, переносят ее на предметное стекло и микро скопируют (окуляр х10, объектив х40).

При исследовании на протистов предметное стекло должно быть смочено 1 %-ным раствором Люголя.

Исследование овощей, крупных плодов и бахчевых с отбором проб методом смывов. Для одноименных продуктов берут отдельно пронумерованные центрифужные пробирки. В каждую из них наливают по 4–5 мл 20 %-ного раствора глицерина и помещают кисточку, которой многократно и с нажимом производят смыв с поверхности 10–15 экземпляров с таким расчетом, чтобы общая площадь смыва одного и того же продукта составляла 0,5–1,0 м². При этом после каждого смыва кисточку ополаскивают и отжимают о края пробирки. После смывов кисточки вкладывают в пробирки и доставляют в лабораторию для исследования.

Начинают его с добавления в пробирки с кисточками по 5–6 мл одного из флотационных растворов (с относительной плотностью 1,38-1,4), в котором кисточку многократно и тщательно промывают вертикальными и круговыми движениями. После промывки кисточку отжимают о края пробирки и удаляют. Флотационный раствор добавляют в пробирки до образования выпуклого мениска по краю центрифужной пробирки и накрывают покровным стеклом до соприкосновения с мениском. Оставляют на 20–30 мин. Поверхностную пленку с покровного стекла переносят на предметное стекло. При исследовании на протестов, перед переносом висячей капли на предметное стекло, его смачивают 1 %-ным раствором Люголя. Микроскопируют с окуляром х10 и объективом х40. Проводя эти исследования нужно помнить, что соли флотационных растворов при длительном их выдерживании склонны к кристаллизации.

Исследование овощей, столовой зеленой травы на личинки гельминтов. Столовую зелень и другую растительную продукцию исследуют на наличие личинок стронгилоид, анкилостом и других нематод по методу Берманна, а адолескариев трематод по методу Котельникова и Акулина в соответствии с МУК 4.2.796-99.

Наибольшее количество личинок стронгилоид обнаруживают в прикорневой зоне растений. Для дифференциации личинок паразитических нематод от свободноживущих используют метод Корта, который доказал, что свободноживущие нематоды погибают под воздействием формалина быстрее, чем паразитические. При этом жидкость с личинками помещают в чашку Петри или на часовое стекло. При добавлении к ней 40 %-ного раствора формалина в соотношении 1:5 свободноживущие личинки погибают через 5–8 мин, а паразитические остаются живыми в течение 15–20 мин, но подвижность их уменьшается.

Исследование на энтеробиоз. Материал для исследования на энтеробиоз получают путем соскобов вокруг ануса. Производят его вечером через 1–1,5 ч после того, как больной лег спать (или утром до туалета), спичкой, срезанной наискось и смоченной изотоническим раствором хлористого натрия или 2 %-ным раствором двууглекислой соды. Собранную на конце спички слизь счищают краем покровного стекла в каплю жидкости на предметном стекле, покрывают его покровным стеклом и исследуют под микроскопом. При массовых обследованиях, когда соскобы берут в детских учреждениях, использованную спичку помещают в каплю жидкости на предметном стекле и после ее подсыхания покрывают другим предметным стеклом. Затем, завернув в бумагу и закрепив резинкой, доставляют в лабораторию.

Нередко пациенту на дом выдают пробирку с ватным тампоном, которым он утром протирает перианальные складки и, поместив тампон обратно в пробирку с небольшим количеством воды, приносит в лабораторию. Тампон прополаскивают, центрифугируют жидкость и, получив осадок, исследуют его под микроскопом.

Целлофановый метод Холла. Квадратный кусочек целлофана укрепляют резинкой на стеклянной палочке. Соскоб делают сухим целлофаном и помещают его в пробирку В лаборатории целлофан слегка сдвигают с палочки и, срезав его кончик ножницами, расправляют на предметном стекле; затем смачивают децинормальным раствором едкого натра, покрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом.

Метод с целлюлозной лентой Грэма. Полоску целлюлозной ленты прижимают клейкой стороной к перианальным складкам обследуемого, затем той же стороной – к предметному стеклу и исследуют без покровного стекла; можно добавлять каплю толуена.

Каледин для этих целей предложил применять целлулоидные диски, вырезанные из отмытой рентгеновской пленки и смоченные глицерином; диски исследуют на предметном стекле в капле силикатного клея.

Подногтевой соскоб. Края ногтя, ногтевое ложе, подногтевые пространства смачивают 0,5–1 %-ным раствором едкой щелочи и протирают влажными ватными тампончиками. Отжав их в слабощелочном растворе щелочи, центрифугируют и исследуют осадок.