Читать книгу "Анализы. Актуальные сведения по лабораторным исследованиям под рукой"

Особенности кала детей грудного возраста

В первые 1–2 дня жизни у новорожденных выделяется меконий, который представляет собой густую вязкую массу темно-оливкового цвета без запаха. Термином «меконий» обозначают все содержимое кишечника ребенка, накопившееся перед родами и до первого прикладывания к груди.

Состав мекония представлен клетками кишечного эпителия, остатками проглоченных околоплодных вод со слущенными клетками кожи и lanugo, желчью, секретами кишечника и поджелудочной железы.

Объем мекония составляет 60–200 г, и чаще всего он отходит в первые 12 ч. Иногда этот срок увеличивается до 48 ч и редко – до 72 ч.

При исследовании химического состава мекония обнаруживается небольшое количество жира и почти не выявляется белок. Исключение составляют только дети с наследственным тяжелым заболеванием – кистофиброзом поджелудочной железы, при котором резко возрастает содержание альбумина в меконии.

Отсутствие эпителиальных клеток в составе мекония может быть признаком кишечной непроходимости у новорожденного. Содержание мекония в околоплодных водах в начале родов указывает на внутриутробную асфиксию.

После 3-го дня наблюдается переходный стул, а с 5-го дня устанавливаются обычные испражнения. При естественном (грудном) вскармливании кал золотисто-желтого цвета с кисловатым запахом в виде жидкой сметаны. Число испражнений в течение первого полугодия жизни может достигать 5 раз в день, а после 6 месяцев бывает обычно 2–3 раза в день.

При искусственном вскармливании каловые массы обычно более густые (замазкообразной консистенции), светло-желтого цвета, часто неприятного, гнилостного запаха. Число испражнений в течение первого полугодия обычно 3–4 раза в день, а во втором полугодии – 1–2 раза в день.

Суточное количество кала у грудных детей, вскармливаемых женским молоком, небольшое, в среднем около 20–25 г, что составляет по весу 2,5–3 % принятой пищи. При смешанном и искусственном вскармливании количество каловых масс значительно повышается (при смешанном вскармливании – в среднем до 60–65 г, а при искусственном – до 100 г).

Количество экскрементов у детей 1-го года жизни относительно больше, чем у более старших детей и у взрослых.

Копрограмма у здоровых детей несколько различна в зависимости от получаемой ребенком пищи. При вскармливании грудным молоком попадаются лишь единичные кристаллы жирных кислот; с переходом на докорм смесями со слизистыми отварами встречаются единичные зерна крахмала, а у детей, получающих мясо, – единичные мышечные волокна.

Надо помнить, что даже у совершенно здоровых детей первого года жизни, особенно в первые месяцы жизни, микроскопическое исследование кала обнаруживает небольшое количество лейкоцитов, что не дает никаких оснований говорить о воспалительном процессе у них в толстом кишечнике.

В кале почти всех новорожденных имеется большое количество слизи (гиперсекреция слизи свидетельствует о выраженной катаральной реакции слизистой кишечника), а у 1/3 детей – небольшое количество тканевого белка.

Исследование кала на простейшие

Как известно, патогенные простейшие являются эукариотическими одноклеточными микроорганизмами, которые по структуре своих клеток весьма близки к клеткам животных, вследствие чего они принципиально отличаются от патогенных прокариот.

Паразитирование простейших в организме человека и животных стимулирует функционирование гуморальных и клеточных механизмов иммунитета. Однако их протективная роль при различных протозойных инфекциях неодинакова. Она в значительной степени обусловлена физиологическими особенностями самих паразитов, их жизненным циклом, а также взаимоотношениями между паразитом и хозяином.

Простейшие относятся к Protozoa подклассу Animalia, которое включает 7 типов. Представители трех из них – Sarcomastigophora, Apicomplexa, Ciliphora – вызывают заболевания у человека. К патогенным простейшим – возбудителям заболеваний человека – относятся дизентерийная амеба, лямблии, трихомонады, лейшмании, трипаносомы, плазмодии малярии, токсоплазма, балантидии.

В кишечнике человека могут паразитировать следующие простейшие: дизентерийная амеба (Entamoeba histolytica), кишечная амеба (Entamoeba coli), кишечная лямблия (Lamblia intestinalis), крупная инфузория (Balantidium сoli), кишечная трихоманада (Trichomonas hominis) и т. д (табл. 39).

Таблица 39

Основные виды паразитов и оптимальные методы их обнаружения в крови, пунктатах, кале

Методы исследования

Необходимым условием исследования кала на простейшие является изучение свежего материала, взятого не позже 15–20 мин после дефекации, так как вегетативные формы быстро погибают во внешней среде. Обычно вегетативные формы отыскивают в жидких и полужидких испражнениях.

Цисты могут обнаруживаться в оформленном кале. Поскольку цисты более стойки во внешней среде по сравнению с вегетативными формами, при необходимости такой кал можно сохранять в прохладном месте в течение суток.

Окончательно отрицательный ответ можно дать только после 4–5-кратного исследования с интервалами в 2–3 дня. Иногда при этом прибегают к даче слабительного с последующим тщательным исследованием.

При исследовании кала на простейшие используют 2 метода:

1) метод нативного мазка и мазка с раствором Люголя;

2) метод фиксированных окрашенных препаратов.

Первый метод является основным и применяется в большинстве клинико-диагностических лабораторий. Второй (окраска железным гематоксилином по Гейденгайну) – сложен, трудоемок, применяется в редких случаях, когда невозможно обойтись исследованием только нативных препаратов.

В кишечнике человека находится большое количество микроорганизмов. Кал на 40–50 % состоит из погибших бактерий. При усилении процессов брожения, особенно при бродильной диспепсии, в кале можно обнаружить йодофильную флору. Она располагается кучками и скоплениями. Морфология ее различна: палочки, кокки, дрожжевые клетки и др. Все они обладают свойством окрашиваться раствором Люголя в черный или темно-синий цвет. В норме йодофильная флора в кале отсутствует.

Приготовление препаратов

Для приготовления препаратов предварительно растирают комочек кала в небольшом количестве дистиллированной воды до консистенции жидкой кашицы. Затем по капле эмульсию наносят на 4–5 предметных стекол. На 1-м стекле готовят нативный препарат. Содержимое препарата накрывают покровным стеклом. На втором стекле готовят препарат с раствором Люголя. Каловую эмульсию хорошо перемешивают с раствором Люголя (1 г йода, 2 г йодида калия, 50 мл дистиллированной воды). На 3-м стекле готовят препарат с метиленовым синим для обнаружения жирных кислот, мыл и нейтрального жира. На 4-м стекле готовят препарат с глицерином. 5-й препарат готовят с краской Судана 3.

Нативные препараты, окрашенные и неокрашенные, рассматривают под малым увеличением микроскопа. Для более детального изучения используют большое увеличение. Существуют методы накопления цист. Из них наиболее распространен метод флотации с помощью 33 %-ного раствора сульфата цинка.

Эфирно-формалиновый метод обогащения фекалий на цисты

Центрифугируют водную суспензию кала (1: 10). К осадку добавляют 10 мл 10 %-ного раствора формалина. Через 5 мин после перемешивания приливают 3 мл эфира. Пробирку закрывают пробкой, интенсивно встряхивают. Центрифугируют в течение 2 мин при 1500 об./мин. Из осадка делают препараты (нативный и с раствором Люголя).

Морфология простейших

Клетки простейших покрыты плотной эластической мембраной – пелликулой, образуемой периферическим слоем цитоплазмы. Некоторые из них снабжены опорными фибриллами и минеральным скелетом, отсутствующими у бактерий. Цитоплазма простейших содержит компактное ядро или несколько ядер, окруженных мембраной, ядерный сок (кариолимфу), хромосомы и ядрышки, а также структуры, свойственные клеткам многоклеточных животных организмов: эндоплазматический ретикулум, рибосомы, митохондрии, аппарат Гольджи, лизосомы, различные типы вакуолей и др.

Многие простейшие способны активно перемещаться в пространстве посредством временных псевдоподий или постоянно существующих органелл.

Большинство из них обладают гетеротрофным типом метаболизма. У просто организованных форм захват пищи происходит посредством фагоцитоза.

Простейшие с более сложной морфологией имеют специальные структуры, позволяющие поглощать пищу. Дыхание осуществляется всей поверхностью клетки.

Дизентерийная амеба Entamoeba histolitica

Была открыта Ф. А. Лешем в 1875 г. Тип Sarcomastigophora, подтип Sarcodina, класс Lobosea, отряд Amoebida.

Микробиология

Она является обитателем толстой кишки человека и в своем развитии (жизненный цикл) проходит 2 стадии – вегетативную и стадию покоя. К 1-й относятся 3 морфологически различающиеся формы: большая вегетативная (форма magna, или тканевая), просветная, или кишечная (форма minuta, или комменсальная), и предцистная формы. Отдельные стадии переходят одна в другую в зависимости от условий существования в организме хозяина.

Большая вегетативная форма имеет относительно крупные размеры (20–50 мкм) и обнаруживается с патологическими примесями (кровь, слизь) в нативных препаратах из свежих фекалий больного острым амебиазом. Внутренний слой цитоплазмы (эндоплазма) зернистый, наружный слой (эктоплазма) более гомогенный, стекловидный, хорошо заметен при образовании пседоподий. Этой форме свойственно активное и быстрое перемещение посредством эндоплазматических псевдоподий. Для амебы характерны толчкообразное образование псевдоподий и активное поступательное движение. Ядро у живой амебы плохо различимо. В ее эндоплазме могут наблюдаться фагоцитированные эритроциты хозяина, что является отличительным признаком тканевой формы (табл. 40).

Просветная форма амебы живет и размножается в просвете слепой и восходящей части толстой кишки и в основном имеет строение тканевой формы, но меньших размеров (15–20 мкм); выявляется в фекалиях выздоравливающих больных, а также больных с хроническим течением болезни, у носителей. Они передвигаются медленнее, чем тканевая и вегетативная формы. В цитоплазме выявляются фагоцитированные детрит и бактерии. Эритроцитов эта форма не фагоцитирует.

Предцистная форма дизентерийной амебы встречается в испражнениях реконвалесцентов, а также у бессимптомных носителей. Она отличается от других вегетативных форм наиболее медленными движениями.

Циста имеет округлую форму. Она окружена двухконтурной оболочкой и содержит 1 или несколько ядер. В них различают 4, 2 или 1 ядро, большую гликогеновую вакуоль, а у части цист – так называемые хроматоидные тела, представляющие собой включения в виде 1–3 коротких толстых палочек или брусочков с тупыми концами. Присутствие хроматоидных тел такой формы служит одним из основных диагностических признаков цист дизентерийной амебы.

Гликогеновую вакуоль содержат, как правило, цисты, имеющие 1–2, редко – 3 ядра; выявляют ее при окраске раствором Люголя. Хроматоидные тела видны в нативном препарате.

Цисты хорошо сохраняются во внешней среде.

Дизентерийная амеба хорошо культивируется на искусственных питательных средах (таких как среда Павловой, Даймонда и др.).

Различные штаммы амеб неодинаковы для человека по своей вирулентности, от которой зависит патогенез заболевания.

Жизненный цикл

При попадании в тонкую кишку человека оболочка цисты разрушается, и из нее выходит четырехъядерная материнская клетка амебы. После деления образуются 8 одноядерных паразитов, которые превращаются в вегетативные формы, заселяющие толстую кишку хозяина.

Механизм проникновения амеб в стенку кишки связан с выделением ими протеолитических ферментов. Паразиты разрушают эпителий кишки, что сопровождается некрозом и образованием язв. В основном процесс локализуется в слепой и восходящей кишках, но часто поражаются прямая и сигмовидная кишки. В тяжелых случаях углубление язв до мышечной и серозной оболочек кишки вызывает перфорацию кишечной стенки и развитие перитонита. Возможен длительный, хронически протекающий амебиаз, при котором возникают амебомы – опухолевидные образования в стенке толстой кишки.

При проникновении паразитов в кровяное русло происходит гематогенная диссеминация амеб. Чаще всего при этом поражается печень, но иногда патологические процессы развиваются в легких, коже, головном мозге и других органах. Внедрение паразитов в ткани кишечника и размножение тканевых форм происходят при иммунодефицитных состояниях, а также при дисбактериозе кишечника, когда амебы испытывают недостаток в обычном для них объекте питания – бактериях толстой кишки.

Клиническая картина

Амебная дизентерия – типичный антропоноз, при котором человек является источником инфекции, заражающим цистами амеб окружающую среду. Особое значение при этом имеет бессимптомное носительство паразитов, а также наличие хронических больных, длительно выделяющих цисты амеб в окружающую среду.

Таблица 40

Сравнительные признаки строения амеб в нативных препаратах

Лямблии

Тип Sarcomastigophora, подтип Mastigophora класс Zooma-stigophorea, отряд Diplomomadida.

Возбудитель лямблиоза Lamblia intestinalis был открыт Д. Лямблем в 1859 г. Он относится к роду Lamblia, включающему более 100 видов, паразитирует в организме многих позвоночных. Специфическим паразитом человека является L. intestinalis, обитающий в двенадцатиперстной кишке и верхних отделах тонкого кишечника.

Микробиология

Длина паразита составляет приблизительно 15 мкм, ширина в его передней части 7–8 мкм. Форма клетки грушевидная, заостренная к заднему концу. В ее передней части имеется присасывательный диск, при помощи которого лямблии плотно прикрепляются к эпителиальным клеткам тонкой кишки. По продольной оси проходят 2 опорные нити – аксостили, разделяющие тело паразита на симметричные половины, имеющие ядро с крупной кариосомой в середине. От каждой половины отходят 4 жгута (всего 8).

Брюшко имеет вогнутость – присасывательный диск создает отрицательное давление между паразитом и микроворсинками кишечника, что нарушает всасывание в тонкой кишке аминокислот, которыми и питаются сами лямблии.

Движение поступательное, иногда вращательное. Питание лямблий осуществляется осмотически, размножение – путем продольного деления.

Цисты овальной формы (8–14 мкм), окружены плотной прозрачной оболочкой. Внутри цист имеется сложный рисунок (ядра, аксостили, жгуты).

Клиническая картина

Умеренная инвазия тонкого кишечника обычно не вызывает болезненных симптомов. Однако более выраженное заражение этими паразитами приводит к тяжелым кишечным расстройствам. Проникая через желчный проток из двенадцатиперстной кишки в желчный пузырь, лямблии могут явиться причиной хронического холецистита.

Связь лямблий с позвоночным хозяином является видоспецифической.

В частности, лямблии кроликов или мышей не могут существовать в кишечнике человека.

Источниками инфекции являются не только больные люди, но и здоровые носители.

Цисты лямблий сохраняют свою жизнеспособность во внешней среде довольно длительное время.

Трихомонады

Тип Sarcomastigophora, подтип Mastigophora, класс Zoomastigophorea, отряд Trichomonadida.

Трихомонады относятся к роду Trichomonas Davaine, который включает большое количество видов, паразитирующих в организме различных позвоночных.

Паразитами человека являются представители трех видов: Trichomonas hominis, обитающий в кишечном тракте, T. tenax (T. clongata) – паразит полости рта и T. vaginalis (Donne) – паразит урогенитального тракта.

Микробиология

Trichomonas hominis паразитирует в толстом кишечнике. Клетки паразитов имеют грушевидную форму, длина составляет 7–20 мкм. На переднем конце расположены 4 жгутика, отходящих от базальных зерен. Через всю цитоплазму, от области базальных зерен до конца клетки, проходит опорная эластическая нить (аксостиль). Кроме того, с одной стороны тела паразита имеется ундулирующая мембрана, по волнообразному движению которой его распознают. Ядро сферической формы расположено в передней части клетки. У основания имеется щелевидное углубление («жгутиковый карман»), через который происходит захват пищи (бактерий) посредством фагоцитоза, возможно астматическое питание. В цитоплазме иногда видны пищевые вакуоли, содержащие бактерии.

Отдельные виды трихомонад отличаются также друг от друга строением ундулирующей мембраны. Размножаются трихомонады агамно, продольным делением.

Трихомонады – подвижные организмы, быстро перемещаются при помощи жгутиков и ундулирующей мембраны. Стадия цисты отсутствует.

Трихомонады хорошо растут на питательных средах в присутствии бактерий, которыми питаются.

Клиническая картина

T. hominis обитает в толстой кишке человека, где иногда интенсивно размножается. Полагают, что при массивном заражении этим паразитом у ослабленных больных и детей ухудшается течение предшествующих заболеваний толстой кишки.

Балантидии

Тип Ciliophora, класс Kinttofragminophores, подкласс Vestibuliteria, отряд Trichostomatida, род Balantidium.

Паразиты толстой кишки человека – Balantidium coli (Malmsten) относятся к инфузориям, вызывают изъязвление и перфорацию стенок кишечника, что может явиться причиной перитонита.

Микробиология

Клетки балантидий представляют собой крупную инфузорию яйцевидной формы, достигающую 200 мкм. Они густо покрыты короткими ресничками, расположенными продольными рядами. Благодаря ресничкам осуществляются передвижение и заталкивание питательных веществ вместе с током жидкости в цитостом. На переднем конце клетки имеется щелевидное углубление (перистом), на дне которого помещается ротовое отверстие (цитостом). Ядерный аппарат, типичный для инфузорий, состоит из бобовидного макронуклеуса, расположенного примерно в центре клетки, и находящегося по соседству с ним микронуклеуса. В цитоплазме имеются пищеварительные и сократительные вакуоли, на заднем конце тела – анальная пора.

Циста правильной шарообразной формы (50–60 мкм) с отчетливо выраженной бесцветной двухконтурной оболочкой и хорошо заметным макронуклеусом.

Жизненный цикл

В. coli состоит из двух фаз: бесполой и половой (конъюгация). После конъюгации паразит инцистируется. Цисты выводятся наружу с фекальными массами и довольно стойко сохраняются во внешней среде. Они имеют круглую или овальную форму, покрыты двухслойной оболочкой. Заражение человека цистами происходит через рот.

В. Сoli растет на тех же питательных средах, что и дизентерийная амеба.

Клиническая картина

Балантидий может жить в просвете толстой кишки человека, питаясь кишечным содержимым и не оказывая патогенного действия на организм своего хозяина. При внедрении в слизистую оболочку кишечника и проникновении в толщу его стенки паразит начинает питаться клетками хозяина, заглатывая в большом количестве эритроциты. Это приводит к изъязвлению внутренней стенки кишки, что сопровождается тяжелой формой кровавого поноса.

Исследование кала на гельминты

Инвазии людей паразитическими червями распространены довольно широко.

Важнейшим звеном всей работы служит гельминтологическая диагностика. Для постановки диагноза гельминтозов исследуют испражнения, дуоденальное содержимое, мокроту, мочу, содержимое кист, кровь, перианальную и ректальную слизь, содержимое подногтевых пространств.

В клинической лаборатории чаще всего подвергают исследованию кал. Для анализа достаточно иметь небольшое количество материала. В кале можно обнаружить сами гельминты, их фрагменты или яйца.

В кале встречаются яйца следующих гельминтов:

– из нематод (круглых червей) – аскарид, власоглава, томикса, кривоголовки двенадцатиперстной, некатора, трихостронгилиды;

– из трематод – двуустки печеночной, двуустки кошачьей, двуустки ланцетовидной, шистосомы;

– из ленточных червей – цепня невооруженного, цепня вооруженного, лентеца широкого, лентеца малого.

В лабораторию должны доставляться свежие (менее суточной давности) испражнения (разовая порция) в чистой стеклянной посуде. Для контроля лечения направляют все порции фекалий, выделенные в дни приема антигельминтного средства.

Кал прежде всего должен быть подвергнут макроскопическому осмотру. При этом могут быть выявлены целые экземпляры паразитов и их фрагменты (части, стробилы, членики).

Для яиц гельминтов характерна четкая морфологическая структура. Все они имеют оболочку определенного строения, что отличает их от других образований, попадающих в кал.

Яйца каждого вида гельминтов имеют свои постоянные размеры и могут содержать яйцеклетку, развитые личинки или желточные клетки.

Макрогельминтологические исследования

Макроскопическое исследование служит для обнаружения в кале целых гельминтов и их фрагментов невооруженным глазом или с помощью ручной лупы.

Приготовление препарата

Для исследования испражнения смешивают с водой до жидкой консистенции и переносят небольшими порциями в чашку Петри, тщательно осматривая на черном фоне. Пинцетом или препаровальными иглами извлекают все похожие на фрагменты гельминтов белые частицы.

Крупные образования помещают между двумя предметными стеклами и рассматривают под лупой. Более удобен для этой цели способ отстаивания (отмучивания). Собранные фекалии помещают в высокие стеклянные цилиндры, банки (можно в ведро), смешивают с 5–10-кратным количеством воды и дают отстояться. Мутный слой над осадком сливают, снова заливают водой, перемешивают, отстаивают и воду снова сливают. Эту процедуру повторяют, пока вода над осадком не станет прозрачной, затем воду сливают и просматривают осадок в черной или прозрачной кювете на черном фоне.

Дифференцировать отдельные виды гельминтов можно с учетом их анатомоморфологических признаков. Так, определить вид нематод можно только по целым экземплярам, реже по крупным фрагментам.

Распознавание нематод не представляет затруднений; их рассматривают невооруженным глазом или под лупой.

Цестоды можно диагностировать по зрелым членикам, сколексам. Определение вида ленточных червей по членику производят следующим образом. Обнаруженный в испражнениях членик отмывают в воде, помещают на предметное стекло, покрывают другим предметным стеклом и при легком надавливании на край препарата рассматривают на свет. Отмечают форму членика (узкий, длинный характерен для тениид, плоский, короткий – для лентеца широкого), строение матки.

Распознавание крупных цестод по их сколексам производят после дегельминтизации. Отмытого паразита осматривают, отыскивают его тонкий конец. Обнаружив головку, рассматривают ее строение с помощью лупы или под малым увеличением микроскопа. Определение трематод осуществляют только после дегельминтизации на основании особенностей формы, размера, внутреннего строения (расположения семенников и т. д.).

Микрогельминтологические исследования

Изучению подвергают нативные препараты и препараты после специальной обработки.

Самый простой и удобный метод исследования испражнений – метод мазка. Нативный мазок готовят с 50 %-ным раствором глицерина. Для этого деревянной палочкой из разных мест доставленного кала берут частицу величиной со спичечную головку и готовят несколько препаратов.

Кал тщательно растирают на предметном стекле с несколькими каплями 50 %-ного раствора глицерина до получения достаточно равномерного и прозрачного мазка, который занимает почти всю поверхность стекла. Микроскопируют мазок, не применяя покровных стекол. Раствор глицерина хорошо осветляет препарат и предохраняет его от высыхания. При отсутствии глицерина препарат можно готовить с изотоническим раствором хлорида натрия или водой. Вероятность обнаружения яиц гельминтов увеличивается при применении метода толстого мазка.

Метод «толстого мазка с целлофаном» (по Като) применяется для диагностики аскаридоза, трихоцефалеза, анкилостомидоза (для последнего он особенно ценен). Яйца гельминтов обнаруживают в толстом мазке фекалий, осветленных глицерином и подкрашенных малахитовой зеленью. Для этого используют 3 %-ный водный раствор малахитовой зелени, глицерин, 6 %-ный водный раствор фенола.

Из этих компонентов готовят смесь Като: 6 мл раствора малахитовой зелени, 500 мл глицерина и 500 мл раствора фенола смешивают и хранят в закрытой посуде при комнатной температуре. Раствор стабилен, его используют при приготовлении пластинок по Като. Для приготовления их из целлофана нарезают прямоугольные пластинки размером 20 × 40 мм и погружают их в смесь Като на 24 ч, после чего они готовы к употреблению. Хранят готовые пластинки в смеси Като, в хорошо закрытой посуде при комнатной температуре.

Кусочек фекалий величиной с горошину наносят на предметное стекло, покрывают пластинкой по Като и придавливают резиновой пробкой так, чтобы фекалии размазались по стеклу в пределах пластинки. Мазок оставляют при комнатной температуре для осветления на 30–40 мин. Затем рассматривают под микроскопом.

Достоинствами метода являются его простота, гигиеничность, возможность просмотреть большое количество фекалий, что повышает вероятность выявления яиц. Описанным методом можно выявить яйца нематод и цестод.

Фасциола (Fasciola hepatica). Яйцо правильной овальной удлиненной формы. Оболочка гладкая, тонкая, желтого цвета с крышечкой на одном полюсе и плоским бугорком на другом. Оно заполнено множеством желточных клеток. Размеры 130 × 145 × 70–90 мкм.

Ниже представлена сравнительная характеристика гельминтов (табл. 41, 42, 43).

Описторхис (Opisthorchis felineus). Яйцо овальное, вытянутой формы, слегка асимметрично. Оболочка гладкая, тонкая, светло-желтого цвета. На одном полюсе имеется слабо различимая крышечка, на противоположном – бугорок. Внутри яйца содержится развитая личинка (микроцидий). Размеры 26–32 × 11–14 мкм.

Лентец широкий (Dyphyllobothrium latum). Яйцо овальное желтоватого цвета. Оболочка гладкая, прозрачная, толстая. На верхнем полюсе хорошо просматривается крышечка, на противоположном – бугорок. Внутри яйца многочисленные желточные клетки. Размер 68–71 × 45 мкм.

Вооруженный цепень (Taenia solium) и невооруженный цепень (Taeniarhynchus saginatus). Яйца округлые или слегка овальные с толстой коричневой радиально исчерченной оболочкой. Внутри яйца видна онкосфера (зародыш) с тремя парами крючьев. Яйца обоих видов неразличимы. Размер 31 × 40 мкм.

Карликовый цепень (Hymenolepis nana). Яйцо эллипсовидной формы. Оболочка бесцветная с онкосферой внутри. Онкосфера имеет 3 слоя оболочки темно-коричневого цвета. Хорошо заметны 3 пары эмбриональных крючьев. Размер 40 × 50 мкм.

Власоглав (Trichocephalus trichiurus). Яйцо имеет форму лимона. Оболочка толстая, многослойная, золотисто-желтого или коричневого цвета. На полюсах имеются бесцветные пробковидные образования. Размер 50–54 × 22–23 мкм.

Анкилостома (Ancylostoma duodenale). Яйцо овальной формы с закругленными полюсами. Оболочка тонкая, прозрачная, бесцветная. В свежеотложенном яйце хорошо различимы 4 бластомера. Размер 54–70 × 36–40 мкм.

Аскарида (Ascaris lumbricoides). Оплодотворенное яйцо овальной формы, имеет толстую, многослойную оболочку. Наружная оболочка белковая, крупнобугристая, желто-коричневого цвета. Некоторые яйца бывают лишены белковой оболочки.

Яйцо бесцветное или с серо-зеленым оттенком. Размер 50–106 × 40–50 мкм.

Острица (Enterobius vermicularis). Яйцо овальное, асимметричной формы, одна сторона выпуклая, другая утолщена. Оболочка гладкая, бесцветная, многослойная. Внутри яйца зародыш на разных стадиях развития. Размер 50–60 × 20–30 мкм.

Таблица 41

Сравнительная характеристика яиц трематод

Таблица 42

Сравнительные данные о ленточных червях

Таблица 43

Сравнительная характеристика яиц нематод

Методы обогащения

Кроме метода мазков, применяют более сложные, но и более эффективные методы – методы обогащения, основанные на концентрации яиц в препаратах. Эти методы условно можно разделить на 2 большие группы:

1) концентрация яиц на поверхности жидкости (методы флотации, всплывания);

2) концентрация яиц в осадке (методы осаждения, седиментации).

Метод Калантарян (с флотационным раствором). Основан на том, что в жидкости с высокой относительной плотностью яйца гельминтов как более легкие всплывают на поверхность, где и концентрируются.

Для этого используется раствор Калантарян (1 кг нитрата натрия растворяют в 1 л воды; смесь кипятят до образования пленки, остужают; относительная плотность раствора 1,38).

В химическом стакане тщательно размешивают стеклянной палочкой 5–10 г фекалий со 100–200 мл флотационного раствора. Сразу после размешивания удаляют всплывшие на поверхность крупные частицы. Стаканчик покрывают предметным стеклом так, чтобы оно соприкасалось с поверхностью жидкости.

Если жидкости мало, ее следует долить до полного соприкосновения смеси с предметным стеклом. Оставляют для всплытия яиц на 20–30 мин, после чего предметное стекло снимают, кладут под микроскоп и просматривают без покровного стекла.

Хорошо всплывают все яйца, в том числе трематод, крупных цестод, а также неоплодотворенные яйца аскарид, яйца власоглава.

Метод Фюллеборна позволяет исследовать большое количество материала и широко используется.

В небольшую баночку (обычно мазевую) помещают 5 г фекалий и тщательно размешивают с 20-кратным количеством насыщенного раствора хлорида натрия, добавляя его при помешивании небольшими порциями. Всплывшие на поверхность крупные частицы удаляют кусочком бумаги или картона, баночку до краев наполняют раствором хлорида натрия и покрывают предметным стеклом так, чтобы нижняя поверхность соприкасалась с жидкостью. Баночку оставляют стоять на 45–90 мин (в течение этого срока яйца всплывают и держатся на поверхности смеси), затем предметное стекло осторожно поднимают, быстро переворачивают и приставшую пленку микроскопируют под малым увеличением без покровного стекла.

Методом Фюллеборна хорошо выявляются яйца цепня карликового и всех нематод, за исключением неоплодотворенных яиц аскарид. Так как яйца трематод, большинства цестод всплывают, нужно исследовать и осадок со дна баночки. Препараты из осадка малопрозрачны, поэтому для просветления можно добавить каплю глицерина.

Метод Красильникова (с применением детергентов). Под действием поверхностно-активных веществ, входящих в состав детергентов (стиральных порошков), яйца гельминтов освобождаются от фекальных масс и концентрируются в осадке.

Для этого используют 1 %-ный раствор стирального порошка «Лотос» (порошок высушивают в сушильном шкафу при 100 °C в течение 1–2 ч; 10 г сухого порошка растворяют в 1 л водопроводной воды).

В центрифужную пробирку помещают комочек кала и приливают раствор детергента. Соотношение кала к жидкости 1: 10. Хорошо перемешивают их до образования суспензии. Через 30 мин содержимое пробирки встряхивают 1–2 мин и центрифугируют 5 мин при 1500 об./мин. Из осадка готовят 2 препарата на одном стекле.