Читать книгу "Анализы. Актуальные сведения по лабораторным исследованиям под рукой"

В практике работы лаборатории пользуются и другим способом. В этом случае жидкость не подвергается центрифугированию, а отстаивается в течение 24 ч для образования осадка, из которого также готовят мазки для микроскопирования.

Метод закручивания (по Шульману) очень прост, более эффективен, чем метод нативного мазка, однако ограничиваться им при исследовании на гельминты нельзя. Он служит дополнением к методам концентрации яиц и личинок.

В небольшой баночке высотой 6–7 см тщательно размешивают 2–3 г испражнений с 3–5-кратным количеством воды или изотонического раствора хлорида натрия. После этого стеклянной палочкой делают быстрые круговые движения (закручивание) в течение 1–2 мин. При круговом движении яйца и личинки собираются у конца стеклянной палочки. По окончании закручивания палочку с каплей взвеси быстро вынимают, каплю помещают на предметное стекло, а затем микроскопируют.

Метод Бермана применяется для выявления личинок гельминтов (угрицы). Полученный от больного кал (лучше свежевыделенный) в количестве 5 г помещают на мелкую металлическую сетку (удобна цедилка для молока) в стеклянную воронку, закрепленную в штативе. На нижний конец воронки надевают резиновую трубку с зажимом (аппарат Бермана). Сетку (цедилку) приподнимают и в воронку наливают нагретую до 50 °C воду таким образом, чтобы нижняя часть сетки была погружена в воду. Личинки из кала в связи с термотропностью активно выползают в теплую воду и скапливаются в нижней части воронки. Через 2–4 ч зажим открывают, жидкость выпускают в одну или две центрифужные пробирки. Цетрифугируют в течение 2–3 мин, после чего быстро сливают поверхностный слой, а осадок помещают на предметное стекло и исследуют под микроскопом.

Методы исследования других материалов на гельминты

Для диагностики энтеробиоза применяются специальные методы взятия материала: соскоб шпателем и снятие яиц липкой полиэтиленовой лентой. Применение этих методов основано на биологической особенности самок остриц откладывать яйца на перианальные складки кожи при выползании ночью из кишечника. В кале яйца, как правило, не обнаруживаются. Материал для исследования получают утром до дефекации или вечером, после 1,5 ч пребывания в постели.

Метод снятия яиц липкой лентой. Для этого берут кусок липкой ленты шириной около 2 см и длиной около 10 см. Прикладывают липким слоем середину ленты к перианальным складкам кожи, затем приклеивают ее на предметное стекло. В лаборатории ленту отклеивают, вносят под нее на большом протяжении 1–2 капли вазелинового масла и просматривают под микроскопом.

Метод соскоба шпателем. Широко применяется метод перианального соскоба деревянным шпателем. Шпатель (или плоско заточенную спичку) смачивают 50 %-ным раствором глицерина.

Осторожно производят соскабливание с поверхности складок в окружности ануса и нижнего отдела прямой кишки. Затем материал тщательно соскабливают со спички краем покровного стекла, помещают его на предметное стекло в каплю 50 %-ного раствора глицерина. Накрывают тем же покровным стеклом и микроскопируют. Шпатель после однократного пользования сжигают. Соскоб с перианальных складок производят троекратно.

Количественные методы исследования

Количественные методы используют для суждения об интенсивности инвазии путем определения числа яиц в 1 мл фекалий; применяют при оценке эффективности противоглистных препаратов и других методов лечения, а также результатов массовых противоглистных мероприятий. Число яиц подсчитывают до и после проведения соответствующих мероприятий.

Количественные методы применяются при тех гельминтозах, возбудители которых откладывают яйца в кишечнике более или менее равномерно (аскаридозе, трихоцефалезе, анкилостомидозе, трематодозе).

При цестодозах эти методы не используются, так как яйца не откладываются, а выделяются лишь при распаде или разрыве зрелых члеников. Количественные методы не применяются при энтеробиозе, так как острицы откладывают яйца в перианальной области.

Наиболее распространенным из количественных методов является метод Стола. В мерный цилиндр или специальную колбочку наливают децинормальный раствор едкого натра до метки 56 мл, затем прибавляют испражнения до тех пор, пока уровень жидкости не достигнет отметки 60 мл (приблизительно 4 г фекалий). Смесь тщательно взбалтывают со стеклянными бусами, закрыв сосуд пробкой. Тотчас после взбалтывания набирают градуированной пипеткой 0,075 мл смеси, которая содержит 0,005 мл кала. Содержимое пипетки переносят на предметное стекло, покрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом (сосчитывают яйца во всем препарате).

Чтобы подсчитать количество яиц в 1 мл (1 г) фекалий, нужно число яиц умножить на 200. Например, если в 0,075 мл смеси, т. е. в 0,005 мл испражнений, обнаружено 5 яиц, то в 1 мл фекалий будет 1000 яиц.

Консервирование

Консервирование кала при исследовании на яйца гельминтов проводят с применением жидкости Шеляпиной (водный раствор формалина и глицерина), жидкости Красильникова (1 %-ный раствор стирального порошка «Лотос»), 3 %-ного раствора хлористоводородистой кислоты.

Анализаторы кала

Анализаторы скрытой крови в кале иммунохимические. Полуавтоматические, автоматические. Применяются для качественного или количественного определения скрытой крови в кале. Принцип работы основан на применении иммунологического метода определения или измерения гемоглобина в клиническом образце кала.

Глава 9
Исследование выделений половых органов

Исследование выделений половых органов – распространенный анализ, без которого редко обходятся женщины, посещающие гинеколога, а мужчины – урологический кабинет. Материалами для исследований служат выделения из уретры, влагалища, шейки матки, простатический сок, эякулят. Цель исследований – выявление патологических элементов, вызывающих то или иное заболевание или являющихся его проявлением. Как и при всяком лабораторном исследовании, оцениваются внешний вид выделений, микроскопическая картина, а при необходимости проводится и бактериологический анализ.

Исследование эякулята

Эякулят (сперма, семенная жидкость) имеет вязкую консистенцию, белесоватый цвет, запах цветов каштана. Нормальный объем – 2–6 мл, реакция – слабощелочная. В семенной жидкости присутствуют сперматозоиды, единичные лейкоциты и эритроциты. Сперматозоиды, образующиеся в яичках, составляют около 5 % объема; примерно 60 % объема спермы продуцируется семенными пузырьками, около 20 % – простатой, 10–15 % – придатками.

Нормальное количество сперматозоидов – 100–150 млн/мл, активные сперматозоиды – более 60 %, малоподвижные – 10–20 %, неподвижные – до 10 %, живые сперматозоиды – 90–95 %.

Отсутствие сперматозоидов как нормальное явление отмечается только в старости, у молодых – это признак патологии.

Главная цель исследования эякулята – выявление причин бесплодия у мужчин. Наличие неподвижных сперматозоидов или их отсутствие в сперме наблюдаются при воспалении яичек, двустороннем крипторхизме, водянке яичка, расширении вен семенного канатика. Нарушения сперматогенеза (образования сперматозоидов) могут возникать в результате перенесенной гонореи, туберкулеза. Наиболее же частая причина отсутствия сперматозоидов (аспермия) – перенесенный двусторонний эпидидимит (воспаление придатков яичка).

Полное отсутствие самого эякулята может быть следствием врожденных или приобретенных изменений проходимости семявыбрасывающих протоков.

Присутствие в сперме крови или кровяных пигментов указывает на воспалительный процесс в простате или семенных пузырьках. Наличие гноя также является показателем воспаления в мочеполовых путях.

Бактериологическое исследование эякулята проводится в случаях подозрения на туберкулезное или гонорейное поражение яичка, его придатков, семенных пузырьков и простаты.

В семенной жидкости исследуют в основном свойства сперматозоидов, обращая внимание на их количество, подвижность и форму головки.

Количество в норме до 100–150 млн в 1 мл. Как правило, их бывает очень много в каждом поле зрения. Для более точной оценки можно считать в камере. Подвижность в нормальной семенной жидкости очень активная и сохраняется до 24 ч при комнатной температуре. В патологических случаях могут быть малоподвижные и неподвижные (мертвые) сперматозоиды, иногда одновременно подвижные и неподвижные. В этих случаях имеет значение подсчет процента тех и других форм. Подвижность может быть плохо заметна в вязкой жидкости, поэтому надо смотреть в разных полях зрения, в более разжиженной части препарата. Форма головки в норме грушевидная. В патологических случаях может быть прямоугольной, овальной, круглой, раздвоенной, иногда раздвоение средней части и хвоста. Изменение морфологии головки сперматозоида иногда лучше выявляется в окрашенном препарате.

Необходимые реактивы

1. 1 %-ный раствор хлорамина.

2. Спирт.

3. Краска – карболового фуксина Циля – 2 части, насыщенного спиртового раствора эозина – 1 часть, спирта – 1 часть.

4. 1 %-ный водный раствор метиленового синего.

Ход окраски

Препарат высушивают, фиксируют над пламенем.

На несколько секунд наливают 1 %-ный раствор хлорамина (для удаления слизи) и промывают водой, затем спиртом. Красят 2–3 мин краской (фуксин-эозин). Промывают водой, докрашивают метиленовым синим несколько секунд и снова промывают водой.

Анализатор спермы/спермограммы. Полуавтоматический или автоматический. Применяется для качественного или количественного анализа образца спермы, позволяет определить объем, концентрацию сперматозоидов, подвижность, морфологические характеристики.

Исследование секрета предстательной железы

Предстательная железа является непарным органом мужской половой системы. Она участвует в зарождении и развитии мужских половых клеток, обеспечивает их транспорт по семявыводящим путям; ее секрет обеспечивает подвижность сперматозоидов. Простатический секрет для исследований получают путем массажа предстательной железы. В норме он имеет белесоватый цвет, мутный. Под микроскопом в нем находят лецитиновые зерна, сперматозоиды, отдельные амилоидные тельца, изредка – единичные лейкоциты и эритроциты. Надежным показателем секреторной способности предстательной железы является присутствие в сперме цинка и лимонной кислоты, содержание которых коррелирует с активностью кислой фосфатазы. Уровень фруктозы в сперме характеризует функции семенных пузырьков.

Увеличение в простатическом секрете лейкоцитов и уменьшение лецитиновых зерен наблюдаются при простатитах и воспалении семенных пузырьков. При этом исследованию подвергаются не только простатический секрет, но и моча, в которой при остром простатите выявляются гнойные нити, а в крови – лейкоцитоз со сдвигом формулы влево.

Взятие материала

Секрет берут после энергичного массажа предстательной железы. В зависимости от количества его собирают на обезжиренное предметное стекло или в пробирку. Независимо от того, получен материал или нет, необходимо исследовать первую порцию мочи, выделенную после массажа, так как основная масса секрета затекает в мочевой пузырь и моча может содержать большое количество элементов простатического сока. Производят общий анализ сока и исследование на гонококки.

Нормальный секрет простаты густой, вязкой консистенции, беловатого цвета, слабощелочной реакции (рН 7,7–8,5), с характерным запахом. Нормальное количество жидкости колеблется в пределах от 1–2 капель до 3–4 мл.

Приготовление препарата

Каплю жидкости помещают на предметное стекло и покрывают покровным. Мочу с целью исследования на элементы простаты центрифугируют, препараты готовят из осадка. Исследуют нативный препарат, в некоторых случаях – препарат, окрашенный по Романовскому. Исследование препарата производят с малым и большим увеличением.

Микроскопическое исследование

Лейкоциты в нормальном секрете единичные 0–10 или 2000 при подсчете в камере. Количество их увеличивается при воспалительных процессах.

Эритроциты в нормальном секрете единичные (при энергичном массаже предстательной железы). Увеличенное количество наблюдается при воспалительных процессах.

Эпителиальные клетки. Выводные протоки предстательной железы выстланы цилиндрическим и переходным эпителием. Цилиндрический эпителий в большом количестве (часто в состоянии белкового и жирового перерождения) встречается вначале воспалительных процессов и при опухолях.

Макрофаги встречаются при хронических воспалительных процессах и при застое секрета.

Гигантские клетки типа «инородных тел» могут быть в тех же случаях, что и макрофаги.

Амилоидные конкременты (тельца) представляют собой сгущенный секрет железы, имеют овальную форму и слоистое строение. В норме не встречаются. Наличие их указывает на застой секрета в железе, что может быть при воспалительных процессах, аденомах, а также у лиц пожилого возраста, при гипертрофии железы.

Лецитиновые зерна – мелкие, блестящие, сильно преломляющие свет образования. Они являются продуктами секреции эпителия предстательной железы, придают секрету молочный вид, относятся к фосфатам. Нормальный секрет богат ими. Уменьшение их количества наблюдается при злокачественных опухолях простаты.

Тельца Труссо – Лалемана – разнообразной формы образования желтоватого цвета, несколько напоминающие восковидные цилиндры (происхождение и значение их не выяснены).

Кристаллы Беттхера. Напоминают по форме кристаллы Шарко – Лейдена. Окрашиваются в синий цвет при добавлении раствора Люголя. Природа их не ясна. Они появляются при простатитах.

Клетки злокачественных опухолей. Морфологически клетки рака простаты не отличаются от клеток рака другой локализации. Те же признаки атипизма, которыми пользуются для распознавания опухолевых клеток в других секретах, полностью применимы и при этом исследовании. Клетки чаще встречаются в виде комплексов с фестончатыми краями, со стертыми границами между клетками. Для обнаружения их просматривают нативные препараты, сочетая это исследование с окраской препаратов по Романовскому или Папенгейму.

Ретенционный синдром наблюдается при аденоме железы и выражается в обилии макрофагов, многоядерных клеток типа «инородных тел» и амилоидных телец.

Исследование выделений из влагалища и шейки матки

Общеклиническое обследование отделяемого из влагалища производится для оценки микрофлоры, выявления воспалительного процесса, атипичных клеток, а также оценки выработки женских половых гормонов.

Количество влагалищной жидкости в норме составляет 0,76–4,5 мл в сутки. Продукция ее возрастает при половом возбуждении, в результате аллергических реакций и дисгормональных расстройств.

Влагалищная жидкость содержит ионы калия, натрия, магния, хлориды, белок, иммуноглобулины, ферменты (АлАТ, АсАТ, ЛДГ, ЩФ и др.), микроэлементы и другие биологически активные вещества (табл. 44).

Влагалищное содержимое включает самые различные микроорганизмы, из которых наиболее часто встречаются лактобактерии и стафилококки.

Важнейшим фактором стабильности микроэкосистемы влагалища является физиологическое значение рН – 3,8–4,2. Увеличение рН выше 4,5 создает неблагоприятные условия для жизнедеятельности нормальной микрофлоры, сказывается на течении беременности и т. д. У здоровых женщин влагалищный секрет содержит влагалищные палочки (палочки Деферлейна) и плоский эпителий.

Таблица 44

Видовой состав нормальной микрофлоры влагалища

В зависимости от характера влагалищного секрета различают 4 степени чистоты влагалища.

I степень характеризует здоровое состояние половых органов. В секрете – влагалищные палочки и единичные клетки плоского эпителия; реакция секрета кислая (рН – 4–4,5).

II степень отмечается при отсутствии каких-либо общих и местных заболеваний; секрет содержит влагалищную палочку, но имеются и другие микробы (молочнокислая, кишечная палочки), единичные лейкоциты, много эпителиальных клеток; реакция – кислая (рН – 5–5,5).

III степень отмечается при патологическом состоянии полового аппарата; влагалищных палочек мало, много лейкоцитов и разнообразной флоры (стрептококки, стафилококки, грибы и др.), реакция слабокислая или основная (рН – 6–7,2).

IV степень наблюдается при заболеваниях самой влагалищной стенки; в секрете влагалищных палочек нет, очень много патогенных микробов, встречаются трихомонады, много лейкоцитов, эпителиальных клеток мало, реакция основная (рН выше 7,2).

Патологические выделения из половых органов женщин называются белями. Причинами их появления могут быть инфекции, паразитарные и глистные инвазии, микозы, новообразования, механические и термические воздействия и др.

Воспаление влагалища (вагинит, кольпит) может возникнуть в результате трихомонадной инвазии, септической инфекции, заражения гонореей, кандидомикозом (грибковый кольпит) и по другим причинам. Характер выделений – гнойные, слизистые, белые бели, их микроскопическое и бактериологическое исследования помогают установить причину заболевания и назначить соответствующее лечение. С этой же целью исследуется соскоб с поверхности влагалища или шейки матки.

Возможной находкой при исследовании выделений из влагалища может быть примесь крови или скопление больших атипичных клеток, встречающихся при распаде злокачественной опухоли влагалища.

К числу инфекционных заболеваний женских половых органов относятся туберкулезное поражение матки, маточных труб, яичников, влагалища.

Диагностика туберкулеза гениталий достаточно сложна в связи с тем, что это заболевание редко проявляется в форме острого воспаления. Лабораторная диагностика туберкулеза гениталий базируется на исследовании белей, гистологических препаратов (мазков, соскобов); выявлении туберкулезной палочки, бактериологических исследованиях.

При исследовании клеточного состава влагалищных мазков можно определить и характер созревания клеток под влиянием циклически меняющейся секреции половых гормонов. При низкой эстрогенной стимуляции в мазках выявляются парабазальные клетки, по мере возрастания эстрогенной стимуляции в мазке увеличивается содержание промежуточных клеток, а при высокой стимуляции – и поверхностных. Количественная оценка этих изменений производится с помощью индекса созревания, кариопикнотического и эозинофильного индексов.

В норме кариопикнотический индекс равен: в фолликулярную фазу – 1–30 %, в середине цикла —50–80 %, в лютеиновую фазу – более 80 %; эозинофильный индекс равен в фолликулярную фазу – 1–30 %, в середине цикла – 20–70 %, в лютеиновую фазу – более 70 %.

Необходимо подчеркнуть, что воспалительные заболевания половых органов – одна из частых причин женского бесплодия.

Исследование с целью определения функционального состояния яичников

Взятие материала производят из заднебокового свода влагалища. Материалом из заднего свода влагалища пользоваться не следует, так как в нем скапливаются ранее отторгнутые эпителиальные клетки. Содержимое насасывают стеклянной пипеткой с резиновым баллончиком. При необходимости получения большего количества материала содержимое можно брать гинекологической ложечкой. Материал, взятый ватным тампоном, для исследования не годится.

Содержимое равномерно распределяют на предметном стекле. Мазки высушивают на воздухе и окрашивают.

Окраска метиленовым синим

Необходимый реактив

1%-ный водный раствор метиленового синего.

Ход окраски

На высушенный препарат наносят 1–2 капли метиленового синего, покрывают покровным стеклом. Окрашивают в течение 1–2 мин. Затем мазок промывают дистиллированной водой следующим образом: у одного края покровного стекла наносят 1–2 капли дистиллированной воды, к противоположному краю прикладывают полоску фильтровальной бумаги. Таким образом препарат промывают несколько раз до получения бледно-синей окраски, затем высушивают.

Окраска фуксином

Необходимый реактив

3 г кислого фуксина растворяют в 100 мл 95 %-ного спирта. К 12 мл этого раствора прибавляют 100 мл дистиллированной воды.

Ход окраски

На высушенный препарат наливают фуксин на 1 мин, затем смывают водой, высушивают. Таким же способом можно окрашивать мазки и метиленовым синим.

Окраска гематоксилин-эозином

Необходимые реактивы

1. Смесь Никифорова.

2. Водный раствор гематоксилина (гематоксилин – 1 г, калийные квасцы – 50 г, йодистый натрий или калий – 0,2 г, дистиллированная вода – 1000 мл; раствор выдерживают на свету в течение 14 дней, после чего он готов к употреблению).

3. 1 %-ный водный раствор эозина.

Ход окраски

Высушенные мазки фиксируют в смеси Никифорова (10–15 мин). Окрашивают водным раствором гематоксилина в течение 7–10 мин до слабо-фиолетового цвета.

Промывают проточной водой. Окрашивают 1 %-ным водным раствором эозина в течение 30 с. Промывают проточной водой и высушивают.

Окраска по Романовскому

Необходимый реактив

В продаже имеется готовый раствор краски Романовского следующего состава: азур II – 3 г; эозин водорастворимый желтый – 0,8 г; метиловый спирт – 250 мл; глицерин – 250 мл.

В продаже имеется также сухая краска Романовского, из которой готовят раствор краски следующим образом: 3,8 г сухой краски Романовского растворяют в 250 мл чистого метилового или этилового спирта (последний хуже). Раствор оставляют на 3–5 суток, часто взбалтывая для лучшего растворения краски. Затем прибавляют 250 мл чистого глицерина и вновь оставляют на 3–5 суток, периодически взбалтывая. Приготовленная таким образом краска хорошо сохраняется длительное время в темных бутылях в шкафу, где нет ни кислот, ни щелочей, без взбалтывания.

Вновь полученный или приготовленный раствор краски Романовского перед употреблением оттитровывают, т. е. окрашивают несколько фиксированных мазков в течение 25–40 мин различно разведенной краской (1–2 капли краски на 1 мл дистиллированной воды). По хорошо окрашенному препарату устанавливают нужное количество капель краски на 1 мл и время окрашивания.

Ход окраски

Фиксированные мазки укладывают на мостик для окраски, представляющий собой стеклянные палочки, уложенные на 2 противоположных края кювета. Затем мазки заливают краской в разведении 1–2 капли на 1 мл дистиллированной воды. Краску наливают на мазок как можно более высоким слоем, и окрашивание длится в зависимости от температуры воздуха в помещении от 25 до 45 мин. Если температура в помещении низкая или требуется быстрее окрасить мазки, то разведенную краску можно подогревать до 60–70 °C (до кипения доводить нельзя).

После окончания окраски краску смывают (но не сливают) сильной струей воды и ставят мазки вертикально в деревянный штатив для просушивания. Разведенной краской можно пользоваться только в течение одного дня.

Окраска по Папаниколау

Необходимые реактивы

1. Смесь Никифорова.

2. Спирты 95, 90, 80, 70 и 50°.

3. Гематоксилин Гарриса.

4. 0,25 %-ный раствор соляной кислоты.

5. Краска оранжевая Г.

6. Краска (ЕА-36).

7. Абсолютный спирт.

8. Ксилол.

9. Канадский бальзам.

Приготовление гематоксилина Гарриса

1 г гематоксилина растворяют в 10 мл абсолютного спирта, 20 г калийных квасцов растворяют при нагревании в 200 мл дистиллированной воды. Через 24 ч оба раствора соединяют и прибавляют 0,5 г красной или желтой окиси ртути. Раствор нагревают до кипения, остужают и через 24 ч фильтруют.

Приготовление раствора краски оранжевая Г

К 100 мл 0,5 %-ного спиртового раствора оранжевой краски Г добавляют 0,015 г фосфорно-вольфрамовой кислоты.

Приготовление составной краски (ЕА-36)

45 мл 0,5 %-ного спиртового раствора светлой зеленой, 10 мл 0,5 %-ного спиртового раствора бисмаркбраун, 45 мл 0,5 %-ного спиртового раствора эозина желтоватого (водо– и спирторастворимого), 0,2 г фосфорно-вольфрамовой кислоты, капля насыщенного водного раствора углекислого лития.

Ход окраски

Мазки после фиксации проводят последовательно через сосуды, содержащие 80 %-, 70 %– и 50 %-ные спирты и дистиллированную воду. Затем 6 мин гематоксилином Гарриса осторожно споласкивают дистиллированной водой и погружают (6 раз) в 0,25 %-ный раствор соляной кислоты.

Далее на 6 минут кладут в сосуд с проточной водопроводной водой и обмывают дистиллированной водой. Затем проводят через 50, 70, 80 и 95 %-ные спирты. Обезвоженные таким образом препараты окрашивают в течение 1,5 мин краской оранжевой Г, споласкивают в двух сменах 95 %-ного спирта и красят в течение 1,5 мин составной краской (ЕА-36). Мазки отмывают от избытка краски в трех сменах 95 %-ного спирта. Далее препараты просветляют проведением через абсолютный спирт, через смесь абсолютного спирта и ксилола в равных объемах и наконец через ксилол, после чего заключают в канадский бальзам.

Из приведенных выше окрасок самые простые – окраска фуксином и метиленовым синим, но эти окраски не дают полного представления обо всей цитологической картине. Метод Папаниколау сложен, требует много дефицитных и дорогостоящих реактивов, поэтому реже используется в практической работе лабораторий. Окраска по Романовскому вполне пригодна для цитологического исследования влагалищных мазков и выгодно отличается тем, что может применяться в любой лаборатории.

Клеточный состав влагалищного мазка

В мазках из влагалища различают 4 вида клеток плоского эпителия.

1. Клетки поверхностные большие (35–55 мк), полигональной формы, ядро маленькое (6 мк), пикнотичное. Клетки чаще располагаются раздельно. Цитоплазма клеток очень слабо окрашивается, ядро темное. В большом количестве встречаются главным образом с 9 по 14-й день менструального цикла.

2. Промежуточные клетки большие (25–30 мк), форма неправильная, ядро более крупное, круглое или овальное. Клетки часто располагаются пластами. Цитоплазма окрашивается интенсивнее, чем у поверхностных клеток, ядро более светлое. Встречаются во всех фазах менструально-овариального цикла.

3. Парабазальные клетки – меньших размеров, круглой или овальной формы, с большим круглым ядром. Диаметр ядра немного меньше, чем ширина ободка цитоплазмы. Окрашиваются чаще в базофильные тона. Иногда морфологические черты парабазальных клеток неясно отличимы от клеток базальных.

4. Клетки базальные (или атрофические) – округлой формы, несколько меньших размеров, чем парабазальные, ядро круглое, большое, занимает большую часть клетки. Цитоплазма окрашивается в интенсивные базофильные тона (некоторые авторы называют клетки с такой морфологией парабазально-базальными). Клетки встречаются во время менопаузы и единичные во время менструаций и после родов.

Слизистая оболочка влагалища в норме выстлана многослойным плоским эпителием. В зависимости от соотношения клеток разных слоев эпителия в мазках различают 4 типа клеточных реакций, которые позволяют судить о функциональном состоянии яичников.

1. Много базальных клеток и большое количество лейкоцитов. Этот тип мазка указывает на резкую недостаточность гормонов яичников (эстрогенов).

2. В мазке значительное количество базальных клеток, довольно много промежуточных, значительное количество лейкоцитов. Соответствует умеренно выраженной недостаточности гормонов.

3. В мазке преобладают промежуточные клетки, иногда нечетко контурированные, могут лежать пластами. Базальных клеток немного. Такая картина мазка указывает на легкую степень недостаточности эстрогенов.

4. Мазок состоит из поверхностных клеток. Такой тип мазка соответствует достаточной секреции эстрогенов.

Исследование влагалищного мазка нельзя производить при наличии воспалительных процессов (выделений), после влагалищных манипуляций, при внутривлагалищном применении медикаментов. После полового сношения мазки берут не раньше чем через 24 ч.

Тест влагалищного мазка применяется для установления показаний и контроля над результатами гормонотерапии. У женщин с нормальным овариально-менструальным циклом картина влагалищных мазков в зависимости от фазы цикла может быть третьей или четвертой (фаза пролиферации – третий тип реакции, в период овуляции и в ближайшие дни после нее – третий или четвертый).

Для решения вопроса о функциональном состоянии яичников применяют ряд цитохимических (определение гликогена и ферментов в клетках) и биохимических методов (определение ферментов во влагалищном содержимом, кислотности, молочной кислоты и др.).

Для исследования влагалищных мазков также используется люминесцентная и фазовоконтрастная микроскопия, данные которой дополняют трактовку функционального состояния яичников. Для более правильной оценки влагалищного мазка, кроме вида клеток и их количества, учитывают так называемые индексы; наибольшее значение они имеют для суждения о нарушении функции яичников. К таким индексам относятся:

1) кариопикнотический индекс – отношение числа поверхностных клеток с пикнотическими ядрами к общему числу клеток мазка;

2) атрофический индекс (индекс глубоких клеток) – отношение числа базальных и парабазальных клеток к общему числу клеток мазка;

3) индекс промежуточных клеток – отношение числа промежуточных клеток к общему числу клеток мазка;

4) эозинофильный индекс – отношение числа ацидофильных поверхностных клеток к общему числу базофильных поверхностных клеток.

При изучении цитологической картины влагалищного мазка можно использовать упрощенную схему Видаля (табл. 45).

Таблица 45

Оценка кольпоцитограммы

В настоящее время цитологический метод оценки функции яичников заменяется определением концентрации половых гормонов в крови.

Наибольшее значение имеет кариопикнотический индекс, показатели которого наиболее точно совпадают с уровнем выделения с мочой половых гормонов (табл. 46).

Таблица 46

Показатели кариопикнотического индекса в течение овуляторного менструального цикла

Исследование на клетки новообразований

Материал, взятый из влагалища путем отсоса пипеткой с пораженного участка (эрозии, язвы), тампоном или путем отпечатка, может служить для обнаружения клеток злокачественных опухолей. Из полученного отделяемого приготавливают тонкие препараты и красят по Романовскому или другими методами, принятыми в цитологии. Если количество полученного материала достаточное, просматривают предварительно нативные препараты.

Исследование влагалищного содержимого на степень чистоты

Мазки для исследования на влагалищную палочку (палочку Деферлейна) готовят так же, как для цитологического исследования. Окрашивают по Граму.

Окраска по Граму

Необходимые реактивы

1. Карболовый раствор генцианвиолета (1 г генцианвиолета растворяют в 10 мл 96 %-ного спирта, раствор выливают в 100 мл 1–2 %-ной карболовой кислоты, взбалтывают).

2. Раствор Люголя (1 г йода, 2 г йодистого калия и 300 мл дистиллированной воды; йод и йодистый калий растворяют сначала в 5–8 мл воды, а затем приливают остальную воду).

3. 96 %-ный спирт или сырец.

4. 40 %-ный раствор карболового фуксина (10 мл карболового фуксина и 90 мл дистиллированной воды).