Читать книгу "Анализы. Актуальные сведения по лабораторным исследованиям под рукой"

1. 5 %-ный раствор соляной кислоты.

2. 2–5 %-ный водный раствор железисто-синеродистого калия (желтая кровяная соль).

Ход исследования

Центрифугируют 15 мл мочи. К осадку прибавляют несколько капель соляной кислоты и несколько капель железисто-синеродистого калия. Делают препарат и микроскопируют. Через 2–5 мин (возможно и раньше) в клетках в положительном случае видны сине-зеленые зернышки. При разрушении клеток гемосидерин лежит свободно.

Гемосидерин в моче встречается главным образом при гемолитических анемиях с внутрисосудистым гемолизом (болезнь Маркиафава – Микели и др.).

Определение порфиринов

Исследование мочи на порфирины связано со значительными техническими трудностями.

Большая часть качественных проб и количественных методов определения основывается на их свойстве флюоресцировать при ультрафиолетовом свете.

Определение миоглобина

Необходимый реактив

Кристаллический сульфат аммония.

Ход исследования

В 5 мл мочи растворяют 2,8 г кристаллического сульфата аммония и фильтруют. Если фильтрат имеет красно-коричневый цвет, то в моче имеется миоглобин (миоглобинурия); если цвет фильтрата нормальный, следовательно, в моче присутствовал гемоглобин, 80 % которого осаждается реактивом.

Миоглобинурии встречаются при тяжелых травмах мышц, электротравмах, тяжелых миозитах и др.

Определение индикана

В нормальной моче индикан содержится в незначительном количестве, которое не обнаруживается обычными качественными пробами.

Индиканурия встречается при интенсивном гниении белковых веществ в кишечнике (колит, непроходимость кишечника, рак, абсцесс кишечника, перитонит, запоры и пр.), а также при усиленном распаде белков в организме (опухоль, эмпиема, абсцессы и др.).

Принцип метода

Превращение индикана в индоксил минеральной кислотой и последующее окисление индоксила (хлорным железом или марганцовокислым калием) в индиго синее или красное.

Проба Яффе

Необходимые реактивы

1. Соляная кислота концентрированная.

2. Хлороформ.

3. 2 %-ный раствор марганцовокислого калия.

Ход исследования

8–10 мл мочи смешивают с равным объемом соляной кислоты, приливают 1–2 мл хлороформа и 1–2 капли марганцовокислого калия. Пробирку закрывают и многократно опрокидывают, не взбалтывая. В присутствии индикана хлороформ окрашивается в голубой, синий или розовый цвет. При наличии в моче йодистых солей хлороформ также дает розовую окраску. В таком случае добавляют кристаллик гипосульфита. Исчезновение розовой окраски хлороформа говорит о присутствии йодистых солей. При наличии индикана розовая окраска не исчезает.

Проба Обермейера

Необходимые реактивы

1. 0,2–0,4 г хлорного железа растворяют в 100 мл концентрированной соляной кислоты (реактив нестоек).

2. Хлороформ.

Ход исследования

10 мл мочи смешивают с равным объемом реактива, добавляют 1–2 мл хлороформа и опрокидывают пробирку несколько раз. Синее окрашивание хлороформа указывает на присутствие индикана в моче.

Микроскопическое исследование осадка мочи

Микроскопия нативного препарата

Принцип метода

Микроскопическое исследование нативных препаратов мочевого осадка, полученного при центрифугировании мочи.

Необходимое оборудование

1. Центрифуга.

2. Микроскоп.

3. Центрифужные пробирки.

4. Предметные и покровные стекла.

Ход исследования

Приготовление препаратов: в центрифужную пробирку помещают 10 мл утренней мочи после тщательного ее перемешивания. Центрифугируют в течение 5 мин при скорости 2000 об./мин. Затем быстрым наклоном пробирки сливают прозрачный верхний слой, а оставшийся осадок переносят пипеткой с тонко оттянутым концом на середину предметного стекла и покрывают покровным. Надо стараться перенести осадок с минимальным количеством жидкости, чтобы покровное стекло покрывало его полностью. Большая капля расплывается, колеблется, препарат становится многослойным, и это затрудняет микроскопические исследования. Изучение препарата начинают с малого увеличения (8 × 10) для общего обзора, а более детальное изучение препарата с количественной оценкой структур производят при большом увеличении (10 × 40). Если структуры встречаются в каждом поле зрения, то количественную оценку выражают их числом в поле зрения, при небольшом количестве структур, когда их встречают далеко не в каждом поле зрения, – числом в препарате.

Различают организованный и неорганизованный осадок.

Организованный осадок

Эритроциты имеют дискообразную форму, окрашены в характерный желто-зеленый цвет. Включения в цитоплазме отсутствуют. В концентрированной моче кислой реакции эритроциты могут приобретать звездчатую форму. При длительном пребывании эритроцитов в моче низкой относительной плотности они теряют гемоглобин и имеют вид одноконтурных или двухконтурных колец. Деление эритроцитов на измененные и неизмененные не имеет первостепенного значения для решения вопроса об источнике гематурии.

Дифференцировать эритроциты надо с дрожжевыми грибами и кристаллами оксалатов округлой формы. Грибы в отличие от эритроцитов чаще овальной формы, более резко преломляют свет, имеют голубоватый оттенок и почкуются. Оксалаты обычно имеют различную величину и резко преломляют свет. Прибавление к препарату осадка капли 5 %-ной уксусной кислоты приводит к гемолизу эритроцитов, оставляя грибы и оксалаты без изменения.

В норме эритроциты либо не встречаются, либо обнаруживаются единичные в препарате.

Гематурия может быть при поражении паренхимы почки (гломерулонефрите, пиелонефрите, опухолях и др.), при тяжелой физической нагрузке и при поражениях мочевыводящих путей (почечных лоханок, мочеточников, мочевого пузыря, уретры).

Лейкоциты в моче имеют вид небольших зернистых клеток округлой формы. При низкой относительной плотности мочи размер их увеличивается, и в некоторых из них («активных») можно наблюдать броуновское движение гранул. При бактериуриях в щелочной моче лейкоциты довольно быстро разрушаются.

Лейкоциты в моче представлены главным образом нейтрофилами, но иногда можно обнаружить лимфоциты и эозинофилы, которые отличаются обильной, равномерной, крупной, преломляющей свет зернистостью. Активные лейкоциты, так называемые клетки Штернгеймера – Мальбина, можно выявить следующими способами.

I способ

Реактив Штернгеймера – Мальбина.

Раствор I: 3 г генцианового фиолетового, 20 мл этилового спирта, 0,8 г оксалата аммония, 80 мл дистиллированной воды. Раствор II: 0,25 г сафранина, 10 мл этилового спирта, 100 мл дистиллированной воды. Рабочий раствор: 3 части раствора I + 97 частей раствора II. Сохраняется в течение 3 месяцев.

Ход исследования

Центрифугируют свежую утреннюю мочу. К осадку прибавляют 1–2 капли реактива, размешивают, каплю берут на стекло, покрывают покровным стеклом и микроскопируют. При этом различают 2 вида лейкоцитов: одни имеют ядра пурпурно-красного цвета и бесцветную или бледно-розовую цитоплазму, другие бледно-синее, иногда бледно-фиолетовое ядро и почти бесцветную цитоплазму. Бледно-синие клетки называются клетками Штернгеймера – Мальбина, в цитоплазме некоторых из них заметно активное движение гранул.

II способ

Реактив – 250 мг эозина, 10 мл глицерина, 2 мл 1%-ного фенола, 0,5 мл 40 %-ного формалина, 87,5 мл дистиллированной воды.

Ход исследования

Такой же, как предыдущий. Клетки Штернгеймера – Мальбина не окрашиваются или имеют бледно-голубой цвет. Ядра всех остальных лейкоцитов окрашиваются в розовый цвет.

III способ

Реактив – 30 мл насыщенного раствора метиленового синего в абсолютном алкоголе, 1,6 мл 1%-ного раствора КОН, 110 мл бидистиллированной воды.

Ход исследования

Каплю реактива наносят на предметное стекло рядом с каплей мочевого осадка. Смешивают и микроскопируют в первые 5–10 мин.

Клетки Штернгеймера – Мальбина бесцветные, ядра остальных лейкоцитов – синего цвета.

В норме в мочевом осадке у мужчин от 0 до 3 лейкоцитов в поле зрения, у женщин – от 0 до 5 лейкоцитов в поле зрения.

Увеличение числа лейкоцитов в мочевом осадке свидетельствует о воспалительных процессах в почках или мочевыводящих путях.

Наличие в моче «активных» лейкоцитов свидетельствует об интенсивности воспалительного процесса независимо от его локализации.

Эпителиальные клетки

Эпителиальные клетки в мочевом осадке имеют различное происхождение, т. е. десквамация их происходит с органов, покрытых различными видами эпителия (многослойного плоского, переходного и кубического призматического).

Клетки плоского эпителия полигональной или округлой формы, больших размеров, бесцветные, с небольшим ядром, располагаются в виде отдельных экземпляров или пластами.

Клетки переходного эпителия различной формы (полигональные, «хвостатые», цилиндрические, округлые) и величины, имеют желтоватую окраску, интенсивность которой зависит от концентрации мочи и наличия пигментов, содержат довольно крупное ядро.

Среди клеток можно встретить двуядерные. Иногда в клетках наблюдают дегенеративные изменения в виде грубой зернистости и вакуолизации цитоплазмы.

Клетки почечного эпителия неправильной круглой формы, угловатые или четырехугольные, небольших размеров (в 1,5–2 раза больше лейкоцита), слегка желтоватого цвета. В цитоплазме клеток обычно выражены дегенеративные изменения: зернистость, вакуолизация, жировая инфильтрация.

В результате этих изменений ядра часто не выявляются. Клетки почечного эпителия относятся к кубическому и призматическому эпителию, выстилающему почечные канальцы. Чаще они располагаются в виде групп, цепочек. В некоторых случаях встречаются в виде комплексов округлой или фестончатой формы, состоящих из большого количества клеток разной величины с явлениями жирового перерождения.

В мочевом осадке практически всегда встречают клетки плоского и переходного эпителия от единичных в препарате до единичных в поле зрения.

Единичные в препарате клетки почечного эпителия на фоне нормальной микроскопической картины мочевого осадка не дают основания говорить о патологии.

Особого диагностического значения клетки плоского эпителия, попадающие в мочу из влагалища, наружных половых органов и мочеиспускательного канала, не имеют, но если их обнаруживают расположенными пластами в моче, взятой катетером, то это может указывать на метаплазию слизистой оболочки мочевого пузыря. Такую картину можно наблюдать при лейкоплакии мочевого пузыря и мочеточников, что является предопухолевым состоянием.

Переходный эпителий выстилает слизистую оболочку мочевого пузыря, мочеточников, почечных лоханок, крупных протоков предстательной железы и простатического отдела мочеиспускательного канала.

Усиленная эксфолиация клеток этого эпителия может быть при острых воспалительных процессах мочевого пузыря и лоханок, интоксикациях, а также при мочекаменной болезни и новообразованиях мочевыводящих путей.

Клетки почечного эпителия можно выявить в мочевом осадке при поражении паренхимы почек (нефритах), интоксикациях, расстройствах кровообращения. Обнаружение клеток почечного эпителия в тесной связи с цилиндрами говорит о тяжелом поражении почек.

Цилиндры – элементы осадка – представляют собой белковые или клеточные образования канальцевого происхождения, имеющие цилиндрическую форму и различную величину. В мочевом осадке различают следующие виды цилиндров: гиалиновые, зернистые, восковидные, эпителиальные, эритроцитарные, пигментные, лейкоцитарные.

Гиалиновые цилиндры имеют нежные контуры, прозрачны, при ярком освещении плохо заметны. На поверхности может быть легкая зернистость за счет аморфных солей или клеточного детрита. Образуются из свернувшегося белка.

Появление гиалиновых цилиндров свидетельствует о развитии протеинурии, что является следствием повышенной проницаемости клубочковых капилляров. Они представляют собой коллоидную форму белка, возникающую при изменении рН. Постоянно гиалиновые цилиндры присутствуют при органических поражениях почек, лихорадочных состояниях.

Зернистые цилиндры имеют более резкие контуры и состоят из плотной зернистой массы желтоватого цвета. Они образуются при наличии в эпителильных клетках выраженной дегенерации.

Восковидные цилиндры имеют резко очерченные контуры и гомогенную с блеском, слегка желтоватую структуру. Образуются из уплотненных гиалиновых и зернистых цилиндров при задержке их в канальцах. Они обнаруживаются при тяжелых поражениях паренхимы почек.

Эпителиальные цилиндры имеют четкие контуры и состоят из слущенных и склееннных друг с другом эпителиальных клеток канальцев. Они появляются при нефрозах, нефросклерозах и других патологических процессах в почках.

Эритроцитарные цилиндры желтоватого цвета, состоят из массы эритроцитов, образуются при почечной гематурии. Они обнаруживаются почти у половины больных с острым гломерулонефритом, а также при почечных паренхиматозных кровотечениях.

Пигментные цилиндры могут быть обнаружены при гемоглобинурии и миоглобинурии; они коричневого цвета, имеют сходство с зернистыми.

Лейкоцитарные цилиндры образуются из массы лейкоцитов, обнаруживаются при гнойных процессах в почках, пиелонефритах.

Кроме цилиндров, образованных из белка и клеток, в мочевом осадке иногда встречаются образования цилиндрической формы из аморфных солей, не имеющие практического значения. Эти образования растворяются при подогревании препарата или прибавлении к нему капли щелочи или кислоты.

В нормальной моче можно встретить единичные гиалиновые цилиндры (1–2 в препарате).

Цилиндрурия является симптомом поражения паренхимы почки; хотя и считается, что вид цилиндров особого диагностического значения не имеет, гиалиновые цилиндры подтверждают ренальную протеинурию, а лейкоцитарные и эритроцитарные дают возможность предположить источник лейкоцитурии и гематурии.

Унифицированное определение числа форменных элементов в суточном объеме мочи по методу Каковского – Аддиса

Принцип метода

Подсчет числа форменных элементов (эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров) в суточном объеме мочи с помощью счетной камеры.

Специальное оборудование

Микроскоп, счетная камера.

Классический вариант исследования требует строгого соблюдения правил хранения мочи на протяжении длительного периода. Мочу собирают в течение суток: утром больной освобождает мочевой пузырь, а затем в течение 24 ч собирает мочу в сосуд с несколькими каплями (4–5) формалина или 2–3 кристаллами тимола; желательно хранить мочу в холодильнике.

Во избежание получения заниженных данных, обусловленных распадом форменных элементов в нейтральной (щелочной) моче или при низкой ее плотности, надо назначать больному в течение суток, предшествовавших исследованию, мясную пищу с ограничением жидкости, чтобы получить мочу кислой реакции и более высокой концентрации. Если нет возможности собрать мочу с учетом описанных условий, то можно собирать ее в течение 10–12 ч. В этом случае точность результата страдает, но собрать мочу легче. Собирают мочу за ночное время следующим образом: в 10 ч вечера больной освобождает мочевой пузырь, мочу выливают, и до 8 ч утра мочеиспускания не должно быть (интервал времени – 10 ч); всю мочу, полученную в 8 ч утра, посылают в лабораторию для исследования. При никтурии такой вариант сбора мочи не подходит.

Ход исследования

Собранную мочу тщательно перемешивают и измеряют ее объем. Для исследования получают осадок из количества мочи, выделенной за 12 мин (1/5 ч), которое рассчитывают по формуле:

Q = V / 5t,

где Q – объем мочи, выделенной за 12 мин, мл;

V – объем мочи, собранной за время исследования, мл;

t – время сбора мочи, ч;

5 – коэффициент пересчета за 1/5 ч.

Рассчитанное количество мочи центрифугируют в мерной центрифужной пробирке при скорости 3500 об./мин в течение 3 мин или при скорости 2000 об./мин в течение 5 мин, отделяют верхний слой, оставляя 0,5 мл мочи с осадком. Если осадок превышает 0,5 мл, то оставляют 1 мл мочи. Осадок тщательно перемешивают и заполняют счетную камеру. Подсчитывают раздельно количество лейкоцитов, эритроцитов, цилиндров (эпителиальные клетки не считают) и рассчитывают содержание форменных элементов в 1 мкл осадка мочи.

Расчет

Если подсчет проводят в камере Горяева, объем которой равен 0,9 мкл, то количество форменных элементов в 1 мкл определяют по формуле:

Х = А / 0,9,

где X – число форменных элементов в 1 мкл;

А – число форменных элементов, подсчитанных во всей камере;

0,9 – объем камеры (мкл).

Для камеры Фукса – Розенталя, объем которой 3,2 мкл, Расчет производят по формуле:

Х = А / 3,2.

Количество форменных элементов, выделенных с мочой за сутки, рассчитывают по формуле:

В = Х × 500 × 5 × 24 = Х × 60 000,

если для исследования взять 0,5 мл (500 мкл) из 12-минутной порции мочи, или:

В = Х × 1000 × 5 × 24 = Х × 120 000,

если осадок был обильным и был оставлен 1 мл (1000 мкл),

где X – число форменных элементов в 1 мкл мочи, оставленной для исследования с осадком;

В – число форменных элементов, выделенных за сутки;

500 (или 1000) – количество мочи, мкл, оставленной с осадком из 12-минутной порции мочи. Умножение на 5 и 24 дает Расчет количества клеток за 24 ч.

Нормальные величины суточной экскреции форменных элементов с мочой – до 2 × 10⁶ лейкоцитов, до 1 × 10⁶ эритроцитов и 2 × 10⁴ цилиндров.

Для подсчета цилиндров необходимо просмотреть не менее 4 камер с сеткой Горяева или одну камеру Фукса – Розенталя.

Унифицированное определение количества форменных элементов в 1 мл мочи методом Нечипоренко

Принцип метода

Определение количества форменных элементов (эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров) в 1 мл мочи с помощью счетной камеры.

Специальное оборудование

Микроскоп, счетная камера.

Ход исследования

Берут одноразовую порцию мочи (желательно утреннюю) в середине мочеиспускания, определяют рН (в моче со щелочной реакцией может быть частичный распад клеточных элементов); 5–10 мл мочи центрифугируют при скорости 3500 об./ мин в течение 3 мин, отделяют верхний слой, оставляя вместе с осадком 0,5 мл (500 мкл) мочи при небольшом осадке или 1 мл (1000 мкл) – при большом. Хорошо перемешивают осадок и заполняют счетную камеру. Подсчитывают отдельно лейкоциты, эритроциты и цилиндры во всей сетке камеры.

Расчет

Рассчитывают количество клеток в 1 мкл осадка мочи по формуле Х = А / 0,9 или Х = А / 3,2 (см. выше).

Установив эту величину, рассчитывают число форменных элементов в 1 мл мочи по формуле:

N = х × 500 / V,

если оставлено 0,5 мл (500 мкл) мочи с осадком.

Или же:

N = х × 1000 / V,

если оставлен 1 мл (1000 мкл) мочи с осадком,

где N – число форменных элементов в 1 мл мочи;

х – число форменных элементов в 1 мкл мочи, оставленной вместе с осадком;

500 (или 1000) – объем мочи, мкл, оставленной вместе с осадком;

V – количество мочи, взятой для центрифугирования.

В 1 мл мочи выделяется до 2000 лейкоцитов и до 1000 эритроцитов; цилиндры отсутствуют или обнаруживаются в количестве не более одного на камеру Фукса – Розенталя или на 4 камеры Горяева (до 20 в 1 мл).

Определение количества форменных элементов, экскретируемых с мочой за 1 мин, по методу Амбурже

Принцип метода

Определение количества форменных элементов, выделенных с мочой за 1 мин, с помощью счетной камеры.

Специальное оборудование

Микроскоп, счетная камера.

Ход исследования

Мочу собирают в течение 3 ч (180 мин). Перемешивают и 10 мл центрифугируют в течение 5 мин при скорости 2000 об./мин.

Надосадочную жидкость отсасывают, оставляя 1 мл, и после перемешивания заполняют камеру. Производят подсчет клеток в 1 мкл осадка мочи по формуле Х = А / 0,9 или Х = А / 3,2 (см. выше). Расчет числа форменных элементов, выделенных за 1 мин, проводят по формуле:

Н = х × 1000 / S × V / t,

где Н – число клеток в минутном объеме мочи;

х – число клеток в 1 мкл осадка;

V – объем мочи за 3 ч;

S – количество мочи, взятое для центрифугирования;

t – время, за которое собрали мочу, в минутах.

За 1 мин в норме с мочой выделяется до 2000 лейкоцитов и до 1000 эритроцитов.

Приведенные методы количественного исследования элементов мочевого осадка могут быть использованы для распознавания скрытой (не обнаруживаемой при ориентировочной микроскопии осадка) лейкоцитурии; для выяснения вопроса о преобладании лейкоцитурии или гематурии и оценки их степени, а также при динамическом наблюдении за этими симптомами для определения эффективности проводимой терапии.

При отрицательных результатах количественного исследования лейкоцитурии у пациентов с подозрением на латентно текущий хронический пиелонефрит повторный подсчет лейкоцитов следует проводить после провокационных проб (наиболее распространен преднизолоновый тест).

Преднизолоновый тест

Принцип метода

Введение гормона активирует воспалительный процесс, и количество лейкоцитов в моче возрастает. Степень лейкоцитурии определяют по методу Нечипоренко до и после внутривенного введения преднизолона.

Специальное оборудование

Микроскоп, счетная камера.

Ход исследования

Утром больной опорожняет мочевой пузырь, и мочу выливают. Через час собирают мочу (контрольная порция), после чего внутривенно вводят 30 мг преднизолона в 10 мл изотонического раствора натрия хлорида.

После вливания с интервалами в 1 ч собирают 3 порции мочи, подлежащие, как контрольная порция, исследованию по Нечипоренко (собирая мочу, берут при мочеиспускании только среднюю порцию).

Еще раз исследуют мочу через 24 ч после вливания преднизолона.

Тест расценивают как положительный, если хоть в одной из порций мочи количество лейкоцитов увеличивается по сравнению с исходным в 2 раза и при этом выявляют активные лейкоциты.

Экспресс-метод определения скрытой лейкоцитурии (метод Gadeholt)

Принцип метода

При проведении пероксидазной реакции цитоплазма лейкоцита приобретает голубую или синюю окраску.

Необходимые реактивы

Краситель – 300 мг диаминофлуорена и 130 мг флюксина В растворяют в 70 мл 95 %-ного этанола. К этой смеси добавляют 11 г ацетата натрия (CH₃COONa × 3Н₂О), растворенного в 20 мл 0,5 %-ной уксусной кислоты, и 1 мл 3%-ной перекиси водорода. Через 48 ч реактив фильтруют, и он становится годным к употреблению. Хранить его необходимо в темной, химически чистой посуде и периодически фильтровать.

Ход исследования

10 мл свежевыделенной мочи фильтруют через фильтровальную бумагу, после чего на бумагу наносят 3 капли красителя. При содержании в 1 мкл мочи более 10 лейкоцитов на месте нанесения краски появляется темно-синее пятно. Проба считается отрицательной, если пятно красного цвета, и сомнительной, если пятно голубого цвета.

Проба проста и достаточно надежна, ответ можно получить через несколько минут. Экспресс-метод выявления скрытой лейкоцитурии имеет большое значение при профилактических осмотрах, особенно детей в яслях, детских садах и школах.

При положительном значении этой пробы лейкоцитурия выявляется и всеми другими методами, используемыми для ее количественного определения.

Неорганизованный осадок мочи

Неорганизованный осадок мочи состоит из солей, выпавших в осадок в виде кристаллов или аморфных масс. Характер солей зависит от коллоидного состояния мочи, рН и других свойств. При кислой реакции мочи обнаруживаются:

1) мочевая кислота – полиморфные кристаллы (ромбической, шестигранной формы, вид бочонков, брусков и др.), окрашенные в желтый цвет (иногда бесцветные). Кристаллы мочевой кислоты растворяются в щелочах, не растворяются в кислотах, макроскопически в осадке мочи имеют вид золотистого песка. Кристаллы мочевой кислоты обнаруживаются при лихорадочных заболеваниях, сопровождающихся повышенным распадом тканей, при тяжелой физической нагрузке, потреблении только мясной пищи, мочекислом диатезе;

2) ураты – аморфные мочекислые соли. Располагаются кучками желтовато-коричневатого цвета. Растворяются при нагревании и при добавлении щелочей. При действии кислот (уксусной или соляной) постепенно превращаются в бесцветные кристаллы мочевой кислоты ромбической формы. Макроскопически ураты после центрифугирования имеют вид плотного кирпично-розового осадка. В таких случаях необходимо освободиться от солей, так как они мешают микроскопическому исследованию. С этой целью используют реактив Селена (4 г буры и 4 г борной кислоты растворяют в 100 мл дистиллированной воды). В центрифужную пробирку после удаления надосадочной мочи наливают реактив Селена, смешивают, центрифугируют вновь и микроскопируют осадок. Ураты в моче появляются при употреблении в пищу продуктов, содержащих нуклеиновые кислоты, а также при повышенном распаде клеток при лейкозах, опухолях;

3) щавелевокислая известь (оксалаты) встречается в кислой моче, но может быть и в моче со щелочной реакцией. Кристаллы имеют форму октаэдров («почтовых конвертов»), а также круглую или овальную форму. Растворяются в соляной кислоте, не растворяются в щелочи и уксусной кислоте. Выпадение солей щавелевокислой извести происходит при употреблении с пищей некоторых фруктов и овощей;

4) углекислый кальций обнаруживается в форме мелких шариков. Растворяется в кислотах, выделяя углекислоту.

При щелочной реакции мочи обнаруживают:

1) кислый мочекислый аммоний (в моче детей может быть при кислой реакции). Имеет форму гирь и шаров, часто с отростками. Растворяется при нагревании и в щелочах. При добавлении кислот (соляной или уксусной) образуются бесцветные ромбические кристаллы мочевой кислоты;

2) трипельфосфаты – бесцветные кристаллы в форме «гробовых крышек». Растворяются в кислотах, не растворяются в щелочах;

3) фосфаты – аморфные массы солей сероватого цвета часто вместе с трипельфосфатами. Растворяются в кислотах, не растворяются в щелочах. Макроскопически осадок белого цвета;

4) нейтральная фосфорнокислая известь – кристаллы клиновидной формы, часто располагающиеся розетками, бесцветные (иногда могут быть в моче при слабокислой реакции). Растворяются в кислотах, не растворяются в щелочах.

Особого диагностического значения неорганизованный осадок не имеет. Большое количество кристаллов мочевой кислоты и уратов встречается при лихорадочных состояниях, процессах, связанных с массивным распадом клеток (лейкозах, опухолях), при почечнокаменной болезни и др.

В патологической моче встречаются:

1) цистин. Имеет вид шестигранных бесцветных прозрачных плиток, обнаруживается при кислой реакции мочи. Растворяется в щелочах, аммиаке, минеральных кислотах. Не растворяется в уксусной кислоте, спирте, ацетоне, эфире;

2) тирозин – кристаллы в виде тонких игл, собранных в пучки. Обнаруживается в моче с кислой реакцией. Растворяется в щелочи, минеральных кислотах. Нерастворим в спирте, ацетоне, эфире;

3) лейцин – блестящие мелкие шары с радиальной и концентрической исчерченностью. Встречаются в моче с кислой реакцией. Растворяются в минеральных кислотах и щелочах. Нерастворимы в спирте, ацетоне, эфире.

Нахождение этих кристаллов имеет диагностическое значение, поэтому для распознавания их недостаточно одних морфологических признаков. Необходимо использовать все микрохимические реакции, характерные для них, так как некоторые формы этих кристаллов имеют сходство с кристаллами мочевой кислоты, жиром, нейтральной фосфорнокислой известью. Кристаллы лейцина, тирозина и цистина обнаруживаются при подострой дистрофии печени, отравлениях фосфором;

4) жирные кислоты имеют вид тонких игл, иногда собранных в пучки. Встречаются редко, при патологических процессах, сопровождающихся жировой дистрофией и распадом клеток;

5) холестерин имеет вид тонких четырехугольных бесцветных пластинок с обломанным углом. Обнаруживается при патологических процессах, сопровождающихся распадом и жировой дистрофией клеток. В моче встречается редко;

6) билирубин – кристаллы в виде мелких желтовато-коричневых иголок, складывающихся в пучки или в виде зернышек. Обнаруживается в моче с желчными пигментами. Билирубин растворяется в щелочах и хлороформе. С азотной кислотой дает зеленое окрашивание;

7) гематоидин – кристаллы в форме ромбов или иголок, которые могут складываться в пучки и звезды. Цвет золотисто-желтый. Являются продуктом распада гемоглобина. В своей молекуле не содержат железа. Образуются в некротизированной ткани, в глубине гематом и в больших участках кровоизлияний;

8) гемосидерин – золотисто-желтые аморфные зернышки, находящиеся внутри клеток (в отличие от гематоидина). Представляет продукт распада гемоглобина и дает положительную реакцию на берлинскую лазурь, так как содержит железо. Обнаруживается при внутрисосудистом гемолизе (болезнь Маркиафава – Микели);

9) липоиды обнаруживаются в поляризационном микроскопе, где они дают двоякое преломление света. Двоякопреломляющие свет капли жира (внутри– и внеклеточные) имеют вид блестящего креста на темном фоне. Обнаруживаются при нефрозах (особенно амилоидно-липоидных);

10) лекарственные кристаллы встречаются при приеме некоторых медикаментов. Кристаллы пирамидона выпадают в виде коричневатых иголок, похожих на кристаллы билирубина, но длиннее, образующих пучки и звезды. Цвет мочи при этом розовато-красноватый. Кристаллы сульфаниламидных препаратов отличаются большим полиморфизмом. Почти всегда окрашены в желтоватый цвет, имеют вид снопов, шаров, брусков и т. д. Многие из них имеют сходство с кристаллами мочевой кислоты. Распознавание их производится при помощи индикаторной бумажки.

Приготовление индикаторной бумаги

Фильтровальную бумагу пропитывают реактивом (см. ниже), высушивают, нарезают тонкими небольшими полосками, хранят в темном месте. Полоску бумаги опускают в осадок мочи. В присутствии кристаллов сульфаниламидных препаратов бумажка дает моментальное ярко-желтое окрашивание.

Необходимые реактивы

1 г парадиметиламидобензальдегида, 2 мл концентрированной НСl, 98 мл 2,24 %-ного раствора химически чистой щавелевой кислоты.

Исследование мочи на опухолевые клетки

Опухолевые клетки могут быть обнаружены в моче, в отсосе и смыве из мочевого пузыря.

Метод Эрлиха

Свежевыделенную утреннюю мочу отстаивают в течение 1–2 ч. Пипеткой со дна собирают осадок и центрифугируют. Отстоявшуюся мочу разливают небольшими порциями в чашки Петри, просматривают на черном и светлом фоне и извлекают (если есть) плотноватые частицы сероватого и красноватого цвета, которые помещают на предметное стекло, растягивают и покрывают покровным. Другие препараты готовят из осадка после центрифугирования. Мочу для исследования на опухолевые клетки нельзя брать после урологического инструментального обследования, так как травмирование слизистой оболочки может привести к повышенной эксфолиации клеток и к их деформации, в результате чего может быть ошибочное толкование.

Получение отсоса из мочевого пузыря

При подозрении на опухолевый процесс мочевого пузыря можно взять отсос из него. После опорожнения мочевого пузыря вводят катетер. На свободный конец катетера надевают шприц Жане и отсасывают содержимое пузыря. Из добытого материала готовят препараты.